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深圳IgG抗體基因

來源: 發(fā)布時間:2024-01-10

單克隆抗體:通過該技術融合形成的雜交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤細胞大量擴增和永生的特性,又具有免疫B細胞合成和分泌特異性抗體的能力。每個雜交瘤細胞由一個B細胞融合而成,而每個B細胞克隆只識別一種抗原表位,因此經篩選和克隆化的雜交瘤細胞只能合成和分泌識別單一抗原表位的特異性抗體,稱為單克隆抗體。其優(yōu)點是結構均一、純度高、特異性強、效價高、血清交叉反應少、制備成本低;缺點是鼠源性mAb對人具有較強的免疫原性,反復免疫人體后可誘導產生人抗鼠抗體,從而削弱了其作用,甚至導致機體組織細胞的免疫病理損傷,因此需要進一步通過抗體工程技術制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。抗體在疫苗接種后的產生是一種主動免疫應答,提供長期的保護作用。深圳IgG抗體基因

由雜交瘤單細胞克隆所產生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個抗原決定簇結合,抗體成分均一,抗體的結構、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過程中只要不發(fā)生變異,不同時間內分泌的抗體都能保持同樣的結構和功能。用這種技術可按需要生產大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學方法所不能達到的。單克隆抗體的發(fā)展經歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個階段。特別是全人源單克隆抗體,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類抗體藥物具有高親和力、高特異性、幾乎沒有毒副作用等優(yōu)點,克服了動物源抗體及嵌合抗體的各種缺點,成為調理性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢;安徽異種抗體研發(fā)團隊單克隆抗體的研究有助于了解免疫系統(tǒng)的功能。

抗體介導I型超敏反應。IgE為親細胞抗體,可通過其Fc段與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的IgE高親和力Fc受體結合,使其致敏。當相同的變應原再次進入機體時,可以直接與致敏靶細胞表面的特異性IgE結合,促使這些細胞合成和釋放生物活性物質,引起I型超敏反應。在人類,lgG是能夠通過胎盤的抗體。胎盤母體一側的滋養(yǎng)層細胞可表達一種特異性的IgG輸送蛋白,稱為FcRn。IgG可選擇性地與FcRn結合,從而轉移到滋養(yǎng)層細胞內,并主動進入胎兒的血循環(huán)中。IgG穿過胎盤的作用在于這是一種重要的自然被動免疫機制,對于新生兒抗傳染具有重要意義。另外,sigA可通過呼吸道和消化道的黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。

抗體特性和功能:IgM占血清Ig總量的5%~10%,血清濃度約為1mg/ml。單體IgM以膜結合型表達于B細胞表面,構成B細胞抗原受體,只表達mlgM是未成熟B細胞的標志。分泌型IgM為五聚體,是分子量很大的Ig,沉降系數為19S,稱為巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通過血管壁,主要存在于血液中。五聚體IgM含有10個Fab段,具有很強的抗原結合能力;含有5個Fc段,比IgG更易啟動補體。天然血型抗體為IgM,血型不匹配的輸血,可導致嚴重的溶血反應。IgM是個體發(fā)育過程中很早合成和分泌的抗體,在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產生IgM,故臍帶血lgM升高提示胎兒有宮內傳染(如風疹病毒或巨細胞病毒等傳染)。IgM也是初次體液免疫應答中很早出現(xiàn)的抗體,是機體抗傳染免疫的“先頭”;血清中IgM升高,提示新近發(fā)生傳染,可用于傳染的早期診斷;多克隆抗體可以用于檢測特定蛋白質在不同組織和細胞中的表達情況。

抗體特性和功能:IgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,根據其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應答產生的主要抗體,其親和力高,在體內分布普遍,具有重要的免疫效應,是機體抗傳染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經典途徑活化補體,并可與巨噬細胞、NK細胞表面Fc受體結合,發(fā)揮調理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結合,借此可純化抗體,并用于免疫診斷。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗核抗體,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反應的抗體也屬于IgG;多克隆抗體可以提供更高的信號強度,因為多個細胞克隆同時產生抗體。深圳IgG抗體基因

多克隆抗體可以通過親和層析或凝集素親和純化方法進行純化,以獲得較高純度的抗體。深圳IgG抗體基因

抗體可變區(qū):重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。深圳IgG抗體基因