多克隆抗體佐劑應用:1.佐劑的類型 實踐中常應用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質體和石蠟油等。也有采用結合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蠟油 5 份;混合,高壓滅菌后保存。用時加熱融化,冷卻至 50℃左右,加抗原進行乳化處理。⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA);弗氏不完全佐劑 10ml;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。初次免疫時,建議用弗氏完全佐劑,以刺激機體產生較強的免疫反應。再次免疫時,一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關抗原時,一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾。單克隆抗體是由單一源頭的B細胞產生的抗體,具有高度特異性。湖北富含脯氨酸11抗體
抗體鉸鏈區:鉸鏈區(hinge region)位于CH1與CH2之間,富含脯氨酸,易伸展彎曲,從而改變抗原結合部位之間的距離,有利于抗體結合位于不同位置的抗原表位。鉸鏈區易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,產生不同的水解片段。不同類Ig的鉸鏈區不盡相同,例如人IgGl、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區較短,IgG3和IgD的鉸鏈區較長,而IgM和IgE無鉸鏈區。J鏈和分泌片:Ig輕鏈和重鏈除上述基本結構外,某些類別的Ig還含有其他輔助成分,如J鏈和分泌片 。河南Prestige Antibodies抗體研發制造抗體在免疫系統中起到了關鍵作用,保護我們免受各種疾病的侵害。
抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好幾種不同的抗體,然后產生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一種抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。
隨后,經1968年和1972年的世界衛生組織和國際免疫學會聯合會討論決定,將具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白統一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構成B細胞膜表面的抗原受體。基本結構:經x線晶體衍射結構分析發現,Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結構,稱為Ig單體,是構成抗體的基本單位。抗體的多樣性來自于基因重排和突變,使其能夠識別各種不同的抗原。
多克隆抗體免疫動物:免疫劑量與注射途徑有關,一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內和跖內皮下注射劑量大,也可采用淋巴結內注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,對家兔而言,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應大10 倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價的抗血清,宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者,可少量多次。免疫周期短者,應大量少次。 兩次注射的間隔時間應長短適宜,太短起不到再次反應的效果太長則失去了前一次激發的敏感作用。一般間隔時間應為 5~7 天,加佐劑者應為 2 周左右。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過敏反應,如注射血清,即使是少量,在再次免疫時,極易引起過敏反應,所以一定要采取措施。特異性抗體可以針對不同的病原體或細胞表面分子,提供精確的免疫保護。湖北富含脯氨酸11抗體
抗體的半衰期較長,可以在體內持續發揮作用,保持免疫防御的持久性。湖北富含脯氨酸11抗體
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。抗原刺激機體,產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。湖北富含脯氨酸11抗體
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