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來源: 發布時間:2023-08-01

多克隆抗體免疫動物:抗體的效價鑒定 不管是用于診斷還是用于調理,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。不同的抗體可以針對不同的病原體,形成免疫記憶以應對未來的傳染。成都同種抗體補給公司

多克隆抗體免疫動物:免疫劑量與注射途徑有關,一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內和跖內皮下注射劑量大,也可采用淋巴結內注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,對家兔而言,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應大10 倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價的抗血清,宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者,可少量多次。免疫周期短者,應大量少次。 兩次注射的間隔時間應長短適宜,太短起不到再次反應的效果太長則失去了前一次激發的敏感作用。一般間隔時間應為 5~7 天,加佐劑者應為 2 周左右。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過敏反應,如注射血清,即使是少量,在再次免疫時,極易引起過敏反應,所以一定要采取措施。杭州同種抗體基因抗體的親和力決定了其與抗原結合的強度,高親和力的抗體能更有效地中和病原體。

抗體主要功能:啟動補體產生攻膜復合物使細胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應抗原結合后,可因構象改變而使其CH2和CH3結構域內的補體結合點暴露,從而通過經典途徑啟動補體系統,產生多種效應功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動補體系統的能力較強,IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動補體,但在形成聚合物后可通過旁路途徑啟動補體系統。通常情況下,lgD不能啟動補體。調理吞噬和ADCC。IgG可通過其Fc段與表面具有相應受體的細胞結合,產生不同的生物學作用。

抗體特性和功能:IgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,根據其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應答產生的主要抗體,其親和力高,在體內分布普遍,具有重要的免疫效應,是機體抗傳染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經典途徑活化補體,并可與巨噬細胞、NK細胞表面Fc受體結合,發揮調理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結合,借此可純化抗體,并用于免疫診斷。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗核抗體,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反應的抗體也屬于IgG。多克隆抗體是由多個不同的B細胞產生的抗體,具有普遍的特異性。

抗體可變區和恒定區:可變區 重鏈和輕鏈的V區分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區域,稱為高變區(hypervariable region,HVR)或互補決定區(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個高變區分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結合抗原的部位。在V區中,CDR之外區域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(framework region,FR)。VH或VL各有四個骨架區,分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。重組抗體技術使得科學家能夠定制和改良抗體,以應對不同的疾病挑戰。安徽同種抗體試劑

抗體工程可以通過改變抗體的結構和特性來提高其療效和穩定性。成都同種抗體補給公司

抗體基本結構:天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個氨基酸殘基組成。重鏈恒定區的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。據此,可將抗體分為5類(class),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相應的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。不同類的Ig具有不同的特征,如鏈內和鏈間二硫鍵的數量和位置、結構域的數量及鉸鏈區的長度等均不完全相同。成都同種抗體補給公司

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