抗原與抗體的制備

抗體的制備

單克隆抗體和多克隆抗體：單克隆抗體(McAb)用雜交瘤技術制備(詳見第三章)，其特點：特異性好，親和力高，只識別一個表位。多克隆抗體(polyclonal antibodies)存在于免疫動物的血清中，可通過直接分離血清獲得，主要應用于免疫學診斷。也可經中性鹽析和層析法進一步提出單一類別的免疫球蛋白(多為IgG)，使診斷及各種研究在更精確的水平上進行。優點：可識別多個表位，缺點：特異性差，易出現交叉反應，親和力低，通過其他抗原的吸收可獲得針對單個抗原決定簇的單價因子血清。嵌合抗體和噬菌體抗體等基因工程抗體制備詳見第三章。 含光微納的微流控產品的耐用性，能夠長時間穩定運行，降低客戶的維護成本。浙江分子診斷微流控產品哪家好

分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料，用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常，從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常，以確定受檢者有無基因水平的異常變化，對疾病的預防、預測、診斷、zhi liao和預后具有重要意義。1．核酸分子雜交技術應用該技術可對特定DNA或RNA序列進行定性或定量檢測，包括Southern印跡雜交、Northern印跡雜交、點雜交、原位雜交等。2．聚合酶鏈反應技術聚合酶鏈反應技術是一種模擬體內DNA半保留復制過程，在體外酶促合成特異性DNA的片段的方法。生化診斷微流控產品前景我們的微流控產品設計獨特，能夠靈活適應不同實驗需求，提供個性化的解決方案。

抗原抗體反應的主要影響因素

(一)抗原和抗體濃度、比例抗原和抗體濃度、比例對抗原抗體反應影響比較大，是決定性因素，如前所述。

(二)電解質抗原與抗體特異性結合后，其親水性減弱，分子表面所帶的電荷易受電解質影響而失去，復合物間的排斥力下降，導致第一階段已形成的可溶性結合物能進一步聯結，出現明顯的凝集或沉淀現象。試驗中常用0.85%的NaCl溶液作為稀釋液，以提供適當濃度的電解質。

(三)溫度適當的溫度可增加抗原與抗體分子碰撞的機會，加速結合物體積的增大，一般而言溫度越高，形成可見反應的速度越快，但過高則會使抗原或抗體變性失活，影響試驗結果。一般在37℃下進行試驗，但也有些抗原抗體在4℃下進行反應較好。

(四)酸堿度pH過高或過低都將直接影響抗原或抗體的理化性質。例如，當pH降至3.0左右時，因接近細菌抗原的等電點，細菌表面蛋白或其他基團所帶的電荷消失，其相互間的排斥力喪失而導致非特異性酸凝集，影響試驗的可靠性。

分子診斷主要技術發展的時間軸早期的分子診斷設備，多為大型集成化設備，包含很多的操作模塊。在原理上，早期的設備并無很多創新，主要是將多種手工操作內容自動化和集成化，發展到基因芯片，才有了原理性的突破。1990年提出的人類基因組計劃、后來的蛋白組學以及從近期開始的微生物組計劃，極大的推動了分子診斷設備的發展。產品方面，較早期時有Affymetrix公司推出的di yi塊商業化基因芯片。接下來是PCR儀器的發展。早期的PCR儀器，是簡單的DNA解鏈、復制、復性等過程，除了水浴鍋自動化，并沒有太多技術含量。數字PCR技術出現后，與生物信息學和微型加工技術關聯起來，發展速度很快。再后來出現了微流控技術和基因測序技術。基因測序技術經歷了一代、二代、三代，目前測序技術，仍然是重要的發展方向。含光微納的微流控產品具有良好的兼容性，能夠與其他設備和實驗平臺無縫集成。

多聚酶鏈反應：多聚酶鏈反應(polymerasechainreaction，PCR)又稱體外核酸擴增技術，即對特定DNA的片段進行非細胞依賴性擴增，其基本過程是將已提取的待測DNA在一對寡核苷酸引物、三磷酸核苷及耐熱DNA多聚酶存在的情況下，分別于90℃、55℃和72℃下經變性、退火和核苷酸鏈的延伸，如此循環數十次以擴增DNA。擴增物經溴乙錠染色后作凝膠電泳，再于紫外燈下觀察特定堿基對數的DNA的片段，以出現橙紅色的電泳帶為陽性。若需進一步鑒定，可將凝膠分離的DNA回收再用特異性探針進行雜交分析。PCR在免疫學中通常應用于ai基因、凋亡相關基因的表達、HLA的定型與基因分析、免疫球蛋白和T細胞受體多樣性研究以及細胞因子、粘附分子的檢測。PCR的方法有30余種，如多重PCR、巢式PCR、二次PCR、共享引物PCR、逆轉錄PCR、錨定PCR等等。現臨床研究蕞常用的是逆轉錄PCR，現簡介如下：首先提取細胞總RNA，然后在逆轉錄酶的作用下，以mRNA為模板合成cDNA，隨后加入特異性引物進行擴增，再經瓊脂糖電泳檢測特異性的DNA，從而反映出某種基因的轉錄狀況。我們不斷進行研發和創新，為客戶提供更多樣化、更高級別的微流控產品。黑龍江驅動方式微流控產品技術

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轉基因技術：轉基因技術是近年來生物技術中的一項重大突破。其建立使得動物可不必通過有性雜交即能獲得新的基因。其基本原理是通過顯微注射或逆轉錄病毒，將外源性基因導入哺乳動物的受精卵或其早期胚胎，并經分子雜交分析胚胎或其后代組織中是否有外源性基因存在及其在體內的表達情況。目前通過轉基因技術建立的轉基因鼠，已應用于研究多種免疫分子的基因表達、自身反應性T細胞的負選擇作用及自身耐受機制、MHC的表達與糖尿病的關系等。此外也可將分離的目的基因與載體(質粒或噬菌體)通過粘性末端結合后，轉移至原核或真核細胞，使其整合到宿主細胞DNA上，藉以生產重組細胞因子等，為進一步研究免疫分子的結構與功能及臨床疾病的診斷提供理想的制劑。浙江分子診斷微流控產品哪家好