上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結合,導致了DNA雙鏈結構的破壞,影響了其他染料的結合染色,導致染色彌散,準確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優點:安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家。山東EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書
為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,更適合結合其他染料或蛋白標記(如P65抗體)等進行多重標記,從而在細胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細胞功能方面的研究。安徽提供EdU細胞增殖檢測試劑盒原理上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的價格是多少?
現在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度
細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢。
注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)孵育時間至少2小時,可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透1、每孔加入150μl細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進行細胞固定;2)如果使用其他的細胞固定劑建議用DEPC水來配置,避免RNA酶降解細胞內的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入300μlTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;EU染色1、通過用10:1去離子水稀釋10×反應緩沖液進行配制1×EU反應緩沖液;2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現用現配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現棕黃色,則需報廢或更換。上海東寰告訴您使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的便捷性。江蘇正規EdU細胞增殖檢測試劑盒購買
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細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。通常根據平均DNA含量或細胞代謝參數進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數目和活細胞數目,或者測定出單個細胞內的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。經過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經歷的傳代數目。山東EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書