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來源: 發布時間:2022-11-09

EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。本試劑盒可以檢測到細胞或組織樣品中單個的增殖細胞,同時也可以對細胞或組織樣品總體的細胞增殖情況進行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養的細胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進行EdU的摻入。細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題?天津口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒

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CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。山東咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢如何?

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EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,終使細胞DNA標記上生物素等探針。

EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現用現配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現棕黃色,則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進行染色反應液的配制:該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。

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EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒

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