ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme - Linked Immunosorbent Assay),其試劑盒基于抗原 - 抗體特異性結(jié)合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測樣本中含有相應(yīng)的抗體或抗原,就會與之特異性結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的二抗或抗原,這種酶標(biāo)記物能夠與之前結(jié)合的物質(zhì)再次特異性結(jié)合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顏色反應(yīng)或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)等可檢測的信號變化。通過檢測信號的強(qiáng)度,可以定量或定性地分析樣本中的目標(biāo)物質(zhì)。例如在檢測某種疾病相關(guān)蛋白時,樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結(jié)合,后續(xù)的反應(yīng)步驟逐步放大信號,從而實現(xiàn)對低濃度蛋白的精確檢測。避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦
ELISA試劑盒的線性范圍是指在檢測過程中,目標(biāo)物質(zhì)濃度與檢測信號之間呈線性關(guān)系的范圍。這個范圍對于準(zhǔn)確測量目標(biāo)物質(zhì)的濃度非常重要。不同的ELISA試劑盒針對不同的目標(biāo)物質(zhì)具有不同的線性范圍。例如,某一檢測特定蛋白質(zhì)的試劑盒,其線性范圍可能是10 - 1000 pg/mL。在這個范圍內(nèi),可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確地計算出樣本中蛋白質(zhì)的濃度。如果樣本中的目標(biāo)物質(zhì)濃度超出線性范圍,就可能導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。因此,在使用試劑盒之前,需要了解其線性范圍,并根據(jù)樣本的預(yù)期濃度選擇合適的試劑盒或者對樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s處理。河南認(rèn)可ELISA試劑盒歡迎選購進(jìn)口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理品牌產(chǎn)品的性價比超高,一握伊麗薩的手。
ELISA試劑盒是一種用于檢測特定蛋白質(zhì)、抗體或其他分子的試劑盒。ELISA是一種酶聯(lián)免疫吸附試驗,利用特異性抗體與抗原或特定分子結(jié)合,然后使用酶標(biāo)記的二抗或底物來檢測結(jié)合事件。ELISA試劑盒通常包括抗體、底物、緩沖液、酶標(biāo)記物等試劑,可用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、生物技術(shù)等領(lǐng)域的研究和診斷。ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。上海伊麗薩生物科技,進(jìn)口ELISA試劑盒代理領(lǐng)域的佼佼者。
ELISA試劑盒也可用于食品安全檢測中的農(nóng)藥殘留檢測。在農(nóng)作物種植過程中,農(nóng)藥的使用不可避免,但過量的農(nóng)藥殘留會影響消費者的健康。ELISA試劑盒能夠檢測多種農(nóng)藥殘留,如有機(jī)磷農(nóng)藥、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等。例如,檢測蔬菜中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的ELISA試劑盒,通過特異性的抗原 - 抗體反應(yīng),可以快速檢測出蔬菜中是否存在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。這種檢測方式具有成本低、速度快的優(yōu)點,能夠?qū)Υ罅康霓r(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行初步篩查,對于保障食品安全具有重要意義。杭州Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。安徽專注ELISA試劑盒廠家價格
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦
ELISA試劑盒的靈敏度是其重要特性之一。高靈敏度意味著它能夠檢測到極低濃度的目標(biāo)物質(zhì)。這得益于ELISA反應(yīng)中抗原 - 抗體特異性結(jié)合的高度親和性以及酶放大信號的作用。在一些疾病的早期診斷中,例如標(biāo)志物的檢測,靈敏度高的ELISA試劑盒可以在發(fā)生早期,體內(nèi)標(biāo)志物含量極低時就檢測到其存在。例如前列腺特異抗原(PSA)的檢測,靈敏的ELISA試劑盒能夠檢測到納克級甚至更低濃度的PSA,有助于前列腺的早期篩查。此外,對于一些微量的細(xì)胞因子檢測,高靈敏度的ELISA試劑盒也能準(zhǔn)確捕捉到其濃度變化,為免疫相關(guān)疾病的研究和診斷提供可靠數(shù)據(jù)。認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦