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在分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究中,核酸染料是不可或缺的工具,用于檢測和分析DNA和RNA。RcView吖啶橙核酸染料是一種新型的熒光染料,以其性能和安全性,逐漸成為實(shí)驗(yàn)室中理想的核酸染色選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性RcView吖啶橙核酸染料能夠與核酸結(jié)合后產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號(hào),其靈敏度與傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB)相當(dāng),但安全性更高。在紫外透射光下,雙鏈DNA呈現(xiàn)綠色熒光,而單鏈DNA和RNA則呈現(xiàn)紅色熒光,這種獨(dú)特的雙色特性使其能夠區(qū)分不同形式的核酸。安全性傳統(tǒng)的EB染料具有強(qiáng)致病性,而RcView吖啶橙核酸染料通過多項(xiàng)致突變性試驗(yàn)(如Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)等),結(jié)果均為陰性,是一種安全的替代品。操作簡便RcView的使用方法與EB完全相同,適用于瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色。用戶只需在融化的瓊脂糖凝膠溶液中加入RcView,輕輕搖勻后倒膠即可。使用 Tn5 轉(zhuǎn)座酶可以保證 DNA的 片段化的質(zhì)量,同時(shí)獲得的蛋白純度高、核酸殘留低,能夠?yàn)楹罄m(xù)的實(shí)驗(yàn)。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag
一步法操作,簡化實(shí)驗(yàn)流程該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)集成在同一管中,無需額外的開蓋或移液操作,減少了實(shí)驗(yàn)步驟和操作時(shí)間,同時(shí)降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。這種一體化設(shè)計(jì)特別適合高通量檢測,能夠顯著提高實(shí)驗(yàn)效率。高效的dUTP/UDG防污染系統(tǒng)OneStepRT-qPCRProbeKit(UDGPlus)引入了dUTP/UDG防污染體系,能夠有效降解含有尿嘧啶的污染物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。熱敏感UDG在逆轉(zhuǎn)錄過程中迅速失活,不會(huì)影響后續(xù)的RT-qPCR效率。高靈敏度與特異性試劑盒采用高質(zhì)量的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的緩沖體系,能夠?qū)崿F(xiàn)低至10拷貝的RNA模板檢測。此外,其多重檢測能力可同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)靶標(biāo),適用于復(fù)雜的樣本分析。適用性該試劑盒適用于多種樣本類型,包括動(dòng)物、植物和微生物的總RNA或mRNA,能夠滿足不同研究領(lǐng)域的多樣化需求。Recombinant Human A2AR Protein-VLPCas9 NLS可用于體外實(shí)驗(yàn)中篩選能夠高效引導(dǎo)Cas9蛋白進(jìn)行DNA剪切的gRNA序列 。
ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端處理上的主要不同點(diǎn)如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脫氧核糖核酸酶活性,它從DNA鏈的3'-OH末端逐步切去單核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一種5'→3'核酸外切酶,能選擇性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。2.**底物特異性**:-**ExoIII**:適底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于雙鏈DNA切刻位點(diǎn)產(chǎn)生單鏈缺口。由于對(duì)單鏈DNA無活性,因此難以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:適底物是5'磷酸化的雙鏈DNA,對(duì)單鏈DNA和5'端未磷酸化修飾的DNA的酶切活性較低,不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。3.**活性差異**:-**ExoIII**:對(duì)具有3'-突出末端(至少有4個(gè)堿基,且具有3'-末端C殘基)的DNA、單鏈DNA、硫代磷酸酯連接的核苷酸無活性。-**Lambda核酸外切酶**:對(duì)5'-OH端的切割速度比5'-P端慢約20倍;對(duì)單鏈DNA的酶切速度比雙鏈DNA慢約100倍。4.**應(yīng)用場景**:-**ExoIII**:可以用于生產(chǎn)特定方向的單鏈DNA,將線性化DNA設(shè)計(jì)成為一端為不切割末端(3'突出端),另一端則設(shè)計(jì)為易切割末端(平端或5'突出端)。
pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實(shí)驗(yàn)中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質(zhì)-DNA相互作用的技術(shù),pA-MNase在此技術(shù)中用于在免疫沉淀后切割染色質(zhì)DNA,以分析特定蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合位點(diǎn)。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質(zhì)-基因組互作研究技術(shù),pA-MNase在此技術(shù)中用于在目標(biāo)蛋白質(zhì)被抗體識(shí)別后,通過核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標(biāo)蛋白質(zhì)相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術(shù)相比傳統(tǒng)的ChIP-Seq具有實(shí)驗(yàn)周期短、信噪比高、可重復(fù)性好以及細(xì)胞投入量低的優(yōu)勢,尤其適用于早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞、**以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。3.**染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)**:pA-MNase在染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中用于染色質(zhì)片段化,它在核小體間DNAlinker上進(jìn)行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過程中染色質(zhì)乳化所帶來的負(fù)面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細(xì)胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對(duì)于后續(xù)的蛋白質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)尤為重要。
5'-3'外切核酸酶活性是指DNA聚合酶能夠從DNA鏈的5'端向3'端切除核苷酸的能力。這種活性通常用于修復(fù)受損的DNA或去除錯(cuò)誤配對(duì)的核苷酸。具體來說,5'-3'外切核酸酶活性可以在DNA合成過程中切除前方的核苷酸,幫助錯(cuò)誤或不需要的序列,從而確保DNA的正確復(fù)制和修復(fù)。在DNA聚合酶中,5'-3'外切核酸酶活性與聚合酶活性相輔相成。聚合酶在合成新鏈時(shí),5'-3'外切酶活性可以在發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤時(shí)進(jìn)行修正,確保合成的DNA鏈的準(zhǔn)確性。例如,E.coliDNA聚合酶I具有這種外切酶活性,可以在合成過程中去除錯(cuò)誤的核苷酸,從而提高DNA的保真度。需要注意的是,BstDNAPolymerase,LargeFragment不具有5'-3'外切核酸酶活性,這使得它在某些應(yīng)用中更為穩(wěn)定,特別是在等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)中,如LAMP(環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增)和RCA(滾環(huán)擴(kuò)增)等。泛素蛋白的C末端通常通過酰胺鍵與靶蛋白的氨基團(tuán)連接在一起,最常見的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團(tuán)相連。Recombinant Human TNFR2/CD120b/TNFRSF1B Protein,hFc Tag
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增突變檢測基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag
磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中回收特定DNA片段的實(shí)驗(yàn)室工具。與傳統(tǒng)的柱純化方法相比,磁珠法具有多個(gè)優(yōu)勢:1.**操作簡便快捷**:磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的操作步驟通常包括凝膠的融化、DNA的結(jié)合、磁珠的洗滌和DNA的洗脫,整個(gè)過程可以在20分鐘內(nèi)完成。2.**高純度和高回收率**:磁珠法能夠穩(wěn)定、高效地從凝膠中回收DNA,純化所得的DNA可直接用于酶切、連接、轉(zhuǎn)化細(xì)菌、測序、PCR、雜交等后續(xù)操作。通常回收率達(dá)到60-80%,對(duì)于200bp以下小片段和10kb以上大片段的回收率有所下降。3.**適用性廣**:適用于100bp以上DNA片段的純化,對(duì)達(dá)到10kb片段DNA的純化也能保持較好的效果。4.**安全性高**:操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環(huán)保和安全。5.**靈活性**:可以根據(jù)實(shí)際狀況靈活調(diào)節(jié)磁珠用量,適應(yīng)不同體積和濃度的樣品處理。6.**自動(dòng)化和高通量**:磁珠法純化試劑盒適合手工操作,也可用于自動(dòng)化工作站或核酸自動(dòng)提取儀,實(shí)現(xiàn)高通量操作。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag