dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學試劑,通常以100mM的濃度提供。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,如聚合酶鏈反應(PCR)、DNA測序、填入反應、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反應等。dATP的化學結構是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA復制過程中用來合成DNA鏈的原料之一。在Sanger測序中,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一種衍生物,缺少3'-OH基團,用于鏈終止反應。dATP溶液應儲存在-20°C的條件下以保持其穩定性和活性,有效期通常為兩年。在生產過程中,dATP通常按照ISO9001標準進行,并在D級清潔室中進行以確保高質量和純度。HPLC確認的純度通常大于99%。dATP溶液不含qPCR、PCR、逆轉錄抑制劑,也不含DNase、RNase以及人類和大腸桿菌DNA,以避免實驗過程中的污染。PNGase F可以用于釋放糖鏈,進而通過質譜等技術進行糖鏈的詳細結構分析。Neuromedin N
T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,屬于RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復以及復制叉重新啟動的過程中扮演著重要角色。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結合蛋白或輔助因子協同作用,與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物。該復合物通過尋找與目標DNA互補的區域進行雜交,以完成鏈置換反應,且此酶本身不具有核酸酶活性。產品應用方面,T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA)技術。它在實驗中與T4UvsY重組酶、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,以優化RPA擴增反應。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,可保存3年,或者-20℃儲存有效期為2年,避免反復凍融。其儲存液通常包含Tris-HCl、KCl、DTT、EDTA和甘油等成分,以保持酶的穩定性和活性。熱失活處理為60℃孵育10分鐘。在使用T4UvsX重組酶時,需要注意其保存液中甘油含量較高,建議單獨分裝保存,并且在操作時穿著實驗服并佩戴一次性手套,以確保安全。此外,該產品供科研使用,不應用于臨床診斷。Recombinant Mouse ANGPT2/Angiopoietin-2 Protein,His Tag在某些疾病中,特定蛋白質的泛素化水平可能發生變化,因此,泛素化蛋白質可以作為疾病的生物標志物。
T4UvsX重組酶在生產時由大腸桿菌表達和純化,指的是利用分子生物學技術將T4UvsX重組酶的基因克隆到大腸桿菌(Escherichiacoli)中,然后通過大腸桿菌的生物合成機制來生產這種酶。具體過程如下:1.**基因克隆**:首先,科學家們會從T4噬菌體中分離出編碼T4UvsX重組酶的基因。2.**載體構建**:將這個基因插入到一個質粒(一種小型、圓形的DNA分子)中,這個質粒可以作為載體,將目標基因導入大腸桿菌。3.**轉化**:將含有T4UvsX基因的質粒轉化到大腸桿菌細胞中。轉化是指將外源DNA引入到細胞內的過程。4.**表達**:一旦質粒進入大腸桿菌細胞,它將開始表達T4UvsX基因,即利用大腸桿菌的核糖體和其他細胞機制來合成T4UvsX重組酶的蛋白質。5.**培養**:將轉化后的大腸桿菌在適宜的培養基中培養,使其繁殖,從而增加T4UvsX重組酶的產量。6.**純化**:培養一段時間后,收集大腸桿菌細胞,通過一系列生化方法(如離心、過濾、層析等)從細胞裂解物中提取并純化T4UvsX重組酶。
脫氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosinetriphosphate,dATP)是一種去氧核苷酸三磷酸,它是DNA合成和復制過程中必需的原料之一。dATP的結構與腺苷三磷酸(ATP)相似,但dATP的五碳糖2號碳上缺少一個-OH基,取而代之的是一個氫原子。dATP是四種dNTPs(脫氧核糖核苷酸三磷酸)之一,四種dNTPs包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP,它們分別對應DNA中的腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤和胸腺嘧啶。dATP的化學式為C10H16N5O12P3,分子量為491.182,CAS登錄號為1927-31-7。在實驗室中,dATP通常以100mM的濃度提供,用于各種分子生物學技術,如PCR、DNA測序和分子克隆技術。dATP溶液需要在低溫條件下保存,通常是-20℃,以保持其穩定性和活性。在DNA測序中,dATP與ddATP一起使用,ddATP是dATP的衍生物,它缺少3'-OH基團,用于Sanger測序中的鏈終止反應。在PCR中,dATP作為DNA聚合酶的底物,用于合成新的DNA鏈。dNTPs的濃度在PCR反應中非常重要,適當的濃度有助于減少錯配和提高擴增效率。通常,四種dNTPs以等濃度混合使用,以減少PCR過程中的錯配誤差。在某些情況下,根據目標序列的長度和組成,可能需要調整dNTPs的濃度,以優化PCR反應。α-凝血酶的多面性質在其臨床使用中提出了挑戰,特別是在平衡其止血效果與血栓形成風險之間。
磁珠本身并不直接參與電泳過程,但它們可以用于電泳后的樣品處理,特別是在核酸(DNA或RNA)的提取和純化過程中。以下是使用磁珠進行電泳后樣品處理的一般步驟:1.**凝膠電泳**:-首先,將DNA或RNA樣品通過凝膠電泳進行分離。凝膠通常是瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠,根據樣品的大小和類型選擇合適的凝膠濃度和緩沖體系。2.**觀察和切割**:-電泳完成后,使用紫外線照射凝膠并使用適當的染料(如EB或SYBRGreen)對DNA或RNA進行染色,以在紫外光下觀察到DNA或RNA的條帶。3.**樣品提取**:-確定目標DNA或RNA條帶后,使用干凈的工具(如切割器或移液槍)從凝膠中切割出含有目標分子的凝膠片段。4.**磁珠準備**:-根據磁珠試劑盒的說明書,準備磁珠。通常包括磁珠的重懸和可能的表面修飾,以確保它們能夠特異性地結合目標核酸。5.**樣品與磁珠混合**:-將切割出的凝膠片段轉移到含有磁珠的溶液中,溫和地混合以促進磁珠與核酸的結合。6.**磁分離**:-將含有磁珠和核酸的混合物置于磁分離架上,利用磁場使磁珠快速聚集在管底,從而實現與溶液的分離。7.**洗滌**:-移除未結合的溶液,向磁珠上加入洗滌液,再次進行磁分離以去除雜質。腸激酶用于重組抗體和其他蛋白質的質量檢測,確保其正確折疊和功能。Recombinant Human Serpin F1/PEDF Protein,His Tag
全長跨膜蛋白CB1它通過與G蛋白的相互作用,調節細胞內的第二信使系統,如cAMP水平。Neuromedin N
EB分子生物學通常指的是溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)在分子生物學中的應用。溴化乙錠是一種常用的熒光染料,主要用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA或RNA。它通過插入核酸的堿基對之間,在紫外光照射下發出橙紅色的熒光,從而實現對核酸的可視化。溴化乙錠與DNA的結合幾乎沒有堿基序列特異性,并且在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.5個堿基插入一個EB分子。然而,值得注意的是,溴化乙錠具有一定的毒性,它是一種強誘變劑,具有高致病性。在實驗結束后,需要對含EB的溶液進行凈化處理,以避免對環境和人體健康造成危害。處理方法包括稀釋EB溶液至低于0.5mg/ml的濃度,然后加入化學物質進行中和,廢棄。除了作為染色劑外,溴化乙錠還可用于凝膠阻滯分析中檢測蛋白與DNA復合物,以及在凝膠電泳過程中觀察單個DNA分子。盡管EB具有這些應用,但由于其潛在的毒性和誘變性,使用時必須格外謹慎,并采取適當的安全措施。在實驗操作中,EB可以加入到凝膠中進行染色,也可以在電泳完成后加入進行染色。先加EB可以節省時間,但可能會導致背景稍微高且信號強度下降,不宜用于核酸分子大小的確定和定量。后加EB可以減少污染,圖譜更清晰,但相對耗時。Neuromedin N