胰蛋白酶是一種肽鏈內切酶，屬于絲氨酸蛋白酶家族，不僅可以水解堿性氨基酸（精氨酸或賴氨酸）羧基端的肽鍵，還可以水解由堿性氨基酸的羧基形成的酰胺鍵或酯鍵。胰蛋白酶可以從牛、豬等哺乳動物的胰臟提取，經過純化后獲得結晶，再制成凍干制劑。牛的胰蛋白酶有223個氨基酸，分子量為23800道爾頓，活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水，不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有機溶劑。胰蛋白酶的等電點pH值為10.1，**適pH值范圍在7.8~8.5左右，pH值大于9.0時不可逆失活。鈣離子對胰蛋白酶的酶活具有保護和***作用。[1]胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。山東EDTA胰酶牌子

胰酶和雙抗怎么保存？

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雙抗的保存:雙抗通常情況下在-20°C保存一年。由于該試劑在4°C下長期存放是不穩定的，分裝后在-20°C下避光保存。青霉素在2-8°C存放時間不應超過4天，鏈霉素相對穩定一點，在2-8°C可以存放30天左右。雙抗從凍融后基本成分已開始降解。胰酶的保存：胰酶可在-20°C下保存一年。隨著時間延長，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存，在使用前從-20°C冰箱取出。盡量避免在4C長期保存。 山東EDTA胰酶牌子胰酶在PH值7.2-8.0的時候，溶液呈淡紅色。

細胞傳代消化時所用胰酶的濃度越高是越好 貼壁細胞的消化：  常用的消化方法主要有酶消化法、離子螯合劑、物理法和冷凍法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法：貼壁干細胞酶消化傳代時通常采用兩種方式：1、加入胰酶等干細胞脫落后，再加培養基中止胰酶作用，離心傳代；2、加入胰酶后，鏡下觀察待干細胞開始脫落時，棄去胰酶，加入培養液并分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對干細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的干細胞先脫落。

胰酶操作步驟：

(*供參考) ：1. 吸取培養基，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以除去殘余的血清。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液，略蓋過細胞即可。根據細胞的特性可以增加或減少胰酶用量，室溫放置30秒至2分鐘。（不同的細胞消化時間有所不同）3. 顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化呈白茫狀；或者用***吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。4. 此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。如果發現消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。 胰酶細胞消化液和胰蛋白酶消化液是一樣的嗎？

    只斷裂賴氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***過程的羧基參胰蛋白酶降解物分析與形成的肽鍵。白色或米黃色結晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000，pI，**適pH值～。pH>。Ca2+對酶活性有穩定作用；重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**劑對其活性有強烈**。臨床用于抗消腫，工業上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。胰蛋白酶*典標準胰蛋白酶來源含量本品系自豬、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品計算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。胰蛋白酶制法要求本品應從檢*合格的牛、羊或豬胰中提取，生產過程應符合現行版《*品生產質量管理規范》的要求。胰蛋白酶性狀本品為白色或類白色結晶性粉末。胰蛋白酶鑒別取本品約2mg，置白色點滴板上，加對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液，即顯紫色。胰蛋白酶檢查酸度取本品，加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液，依法測定（2010年版*典二部附錄ⅥH），pH值應為～。溶液的澄清度取本品，加，依法檢查（2010年版*典二部附錄ⅨB），溶液應澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制備取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯，置100ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（取，混合，pH值為）50ml，溫熱使溶解，冷卻后再稀釋至刻度，搖勻。胰蛋白酶是一種異源蛋白酶，與培養皿結合可以降解細胞膜上的蛋白質。浙江國產胰酶常用知識

胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。山東EDTA胰酶牌子

常用的消化酶有:胰酶：用得**多的是胰酶。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據干細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的干細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于干細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-20度。膠原酶：膠原酶是比較少用的，一般是用原代培養時，從組織消化下干細胞。這種方法作用溫和，對干細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。胰酶的質量是影響干細胞的消化的關鍵因素之一，如果配的比較標準，消化的時候就容易消化，反之就不易消化。還要在你看到消化過頭的情況下，如果干細胞下來的比較多了，這時可以連同cmf或pbs加上營養液一起傳。營養液中有血清，胰酶遇到血清就會自動終止消化，但這樣操作對干細胞是有一定的影響的。對于容易消化的干細胞，加入pbs緩沖液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），棄之，再加入適量胰酶作用10s-40s（根據細胞消化的難易程度），棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將干細胞消化單細胞。山東EDTA胰酶牌子