胰蛋白酶是一種肽鏈內切酶,屬于絲氨酸蛋白酶家族,不僅可以水解堿性氨基酸(精氨酸或賴氨酸)羧基端的肽鍵,還可以水解由堿性氨基酸的羧基形成的酰胺鍵或酯鍵。胰蛋白酶可以從牛、豬等哺乳動物的胰臟提取,經過純化后獲得結晶,再制成凍干制劑。牛的胰蛋白酶有223個氨基酸,分子量為23800道爾頓,活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水,不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有機溶劑。胰蛋白酶的等電點pH值為10.1,**適pH值范圍在7.8~8.5左右,pH值大于9.0時不可逆失活。鈣離子對胰蛋白酶的酶活具有保護和***作用。[1]胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發的二氧化碳可能會極少部分的氣體交換。青海國產胰酶
淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?能,對于胰酶呈黃色的問題,不同品牌也都對此現象進行了測試實驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離,請放心使用。細胞消化時,胰酶不去除對細胞的影響?細胞消化時,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比較好去除。EDTA是一種化學螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要徹底清洗去除,否則細胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存江西胰酶牌子胰酶在細胞培養中的作用和在消化酶中的作用?
胰蛋白酶**點評胰蛋白酶能使痰、血凝塊溶化變稀,易于引流排痰,加速創面愈合凈化,促進肉芽**增生,而不損傷正常**,臨床上有消消腫功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶細胞培養胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的**或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力**強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養液或者胰酶**劑終止胰酶對細胞的作用。1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調PH到左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內過夜。2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內用注射濾器(微米微孔濾膜)抽濾**。3.分裝成小瓶于-20℃保存以備使用可!詞條圖冊更多圖冊參考資料1.胰蛋白酶.化學品數據庫[引用日期2017-05-26].***典**會,***典2010版[M],北京:**醫*科技出版社。
只斷裂賴氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***過程的羧基參胰蛋白酶降解物分析與形成的肽鍵。白色或米黃色結晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000,pI,**適pH值~。pH>。Ca2+對酶活性有穩定作用;重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**劑對其活性有強烈**。臨床用于抗消腫,工業上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。胰蛋白酶*典標準胰蛋白酶來源含量本品系自豬、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品計算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。胰蛋白酶制法要求本品應從檢*合格的牛、羊或豬胰中提取,生產過程應符合現行版《*品生產質量管理規范》的要求。胰蛋白酶性狀本品為白色或類白色結晶性粉末。胰蛋白酶鑒別取本品約2mg,置白色點滴板上,加對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液,即顯紫色。胰蛋白酶檢查酸度取本品,加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液,依法測定(2010年版*典二部附錄ⅥH),pH值應為~。溶液的澄清度取本品,加,依法檢查(2010年版*典二部附錄ⅨB),溶液應澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制備取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取,混合,pH值為)50ml,溫熱使溶解,冷卻后再稀釋至刻度,搖勻。在消化酶中,胰酶主要用于促進消化。
胰酶分裝凍存時要注意什么?胰酶分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時體積會膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復凍融會降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判斷胰酶消化完全?注意:不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才表示消化好了。一般肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙狀移動就可以了,就應該停止消化。6、胰酶適用于哪些細胞消化?它的消化效果與哪些有關呢?胰酶適用于消化細胞間質較少的軟組織和傳代細胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶的消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關。淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?重慶進口胰酶一般多少錢
胰蛋白酶是一種異源蛋白酶,與培養皿結合可以降解細胞膜上的蛋白質。青海國產胰酶
(含)英文名:(含)儲存條件:-20℃產品簡介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經活化的胰蛋白酶,能夠繼續活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質水解為肽,進而分解為氨基酸,其**適溫度約為37℃。胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()由、除菌。本試劑可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下1min左右就可以消化大多數貼壁細胞。使用說明(*供參考):1.貼壁細胞的消化①吸除培養液,用無菌PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,去除殘余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液(),略蓋過細胞即可,室溫放置。(不同的細胞消化時間有所不同)③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化;或者用***吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。④如果發現消化不足,則加入胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()重新消化。⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落。 青海國產胰酶