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江蘇F12培養基答疑解惑

來源: 發布時間:2024-10-20

    第三節培養基的高壓**及效果驗證消毒**在醫學實踐上有著重要意義。它可切斷傳播途徑、控制***擴散造成的危害;也可殺滅物品或器皿上的**,防止醫院***;在醫學微生物檢驗的領域中,消毒**是保正***的病原學檢驗不受外來微生物污染的前提。(一)術語消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐(antisepsis)和無菌(asepsis)是常用術語。下面就術語概念加以敘述。(1)**。是用適當的物理或化學手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。本法適用于制劑、原料、輔料及醫療器械等物品的**。(如外科器械、注射器、基礎培養基**等。)(2)消毒。是破壞物體上活的病原微生物的方法,但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡體溫計、新潔爾滅液擦拭檢查臺等。用于消毒的化學物品稱消毒劑(dis-infectant)。一般而言,消毒對象是指物體而不是機體。(3)防腐。直接使用防腐劑(antiseptics)破壞或**活的病原微牛物的方法。如外科手術前碘液擦洗皮膚、雙氧水清創傷口或**肥皂清冼雙手等。(4)無菌。防止***病原體進入****或物品的操作技術稱無菌操作。無菌即為不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過濾等。無血清培養基適用于需要無血清環境的細胞。江蘇F12培養基答疑解惑

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    2-羥基乙胺可以促進磷脂酰乙醇胺細胞壁組分的合成,從而提高菌株增殖速率,后期菌株增殖放緩,以產酸為主,2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,使得細胞壁疏松,提高細胞通透性,促進谷氨酸釋放到發酵液;cecl3稀土鹽能夠促進菌株增殖,提高谷氨酸相關合成酶的活力,提高谷氨酸的產量;但是過高的濃度會造成菌株增殖放緩和死亡,谷氨酸產量相應下降;發酵中后期,菌株增殖速度放緩,以產酸為主,殼聚糖上的氨基與**細胞壁中帶負電荷的磷壁酸或脂多糖結合,并螯合mg2+、ca2+等陽離子,從而改變細胞壁的通透性,促進谷氨酸分泌到胞外。發酵培養基中添加了琥珀酸,三羧酸循環有一定促進作用,而對乙醛酸循環途徑具有**作用,從而導致中間代謝物更多地流向三羧酸循環途徑,進而促進谷氨酸產量的增加。說明書附圖圖1:cecl3稀土鹽對菌體濃度的影響;圖2:cecl3稀土鹽對谷氨酸含量的影響;圖3:2-羥基乙胺對菌體濃度的影響;圖4:2-羥基乙胺對谷氨酸含量的影響;圖5:2-羥基乙胺對糖酸轉化率的影響。具體實施方式為了使本技術領域:的人員更好地理解本申請中的技術方案,下面將結合本申請具體實施例,對本申請的技術方案進行清楚、完整地描述,顯然。甘肅基礎培養基使用減血清培養基可以減少細胞培養中的血清干擾因素。

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    MEM低血清培養基的平衡鹽系統也不是常規的平衡鹽系統,該平衡鹽系統的緩沖能力強于常規平衡鹽系統的緩沖能力。細胞培養過程中pH值下降產生的原因有很多。在細胞生長非常快時,pH值通常下降得很快,此時可以通過及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養瓶蓋擰得過緊、NaHCO3緩沖系統緩沖能力不夠、培養液中鹽濃度不正確、**、酵母或***污染等也能導致pH值通常下降得很快。這時,可以通過以下幾種方法解決:1)增加培養液中NaHCO3濃度或減少培養箱內CO2濃度。NaHCO3含量在;2)改用不依賴CO2培養液;3)適當松開瓶蓋。在培養液中加HEPES緩沖液,使終濃度為10~25mM;4)在CO2培養環境中改用基于Earle’s鹽配制的培養液,在大氣培養環境中培養改用Hanks’鹽配制的培養液;5)如果是污染造成的則丟棄培養物或用*****。酚紅在細胞培養基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養基的pH值,但低血清或是無血清細胞培養基中酚紅的含量與普通細胞培養基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。酚紅通常對含血清的細胞培養基生產的生物制品質量并不會產生明顯影響,也可通過純化技術去除。

    體外動物細胞培養時需要大量谷氨酰胺,利用量常超過其他必須氨基酸利用量的總和。維生素是維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調節及控制作用。維生素可分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素主要包括泛酸、維生素B12、葉酸、煙酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黃素、維生素C、膽堿、肌醇等;脂溶性維生素主要包括維生素A、D、E、K等;有的培養液中還直接采用ATP和輔酶A;大部分培養基中還有生物素。許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。比如,泛酸可以在細胞內轉變成酰基載體蛋白和輔酶(如輔酶A),參與糖類、脂類和蛋白質代謝中的催化反應;維生素B12則在細胞內參與葉酸的合成和脂肪酸的合成等。不同配方的細胞培養基中維生素的濃度有較大差異。例如,DMEM培養基中維生素的含量約為MEM培養基的兩倍,其原因是一方面不同種類維生素的作用不同,另一方面不同種類的細胞對維生素的需求也可能有較大差異,相應細胞培養基的配方中維生素的含量也可能不同。無機鹽是細胞維持生命活動所不可缺少的營養成分,主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、PO43—、SO42—、HCO3-等,主要作用為維持細胞培養液滲透壓平衡。無酚紅培養基確保了實驗結果的高度準確性。

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    式中:N0—開始**(t=0)時原有活菌數;Nt----經時間t后殘存活菌數。k:意義同上;t:表示理論**時間k=()logNt/N0;比死亡速率常數K,K值大,表明微生物容易死亡。理論**時間的計算需要注意以下幾個問題:(1)K值因不同的微生物種類不同、不同的生理狀態、不同的外界環境,差別很大,實質上,它是微生物熱阻的一種表示形式,微生物的熱阻越大,K值也越小。可以取耐熱性芽孢桿菌的K進行計算。(2)在計算過程中,N0,Nt如何取值?N0為**開始時培養基中活微生物數,可以參考一般培養基中的活微生物數為(1-2)×107個/ml;Nt通常取,既**失敗的概率為千分之一。(3)上述**時間,通常稱之為理論**時間,只可以用于工程計算中,在實踐過程中,因蒸汽的壓力問題(不穩定)、蒸汽的流量問題有很大差別,甚至培養基中的固體顆粒的大小、培養基的粘度等因素,都會影響**效果,實際的設計和操作計算時間可作適當比例的延長或縮短。在實際生產中,通常采用經驗數值:間歇**,121℃,20—30分鐘;連續**,137℃,15—30s,在維持罐中保溫8—20分鐘。4、**溫度的選擇在培養基**過程中,除了雜菌死亡,還伴隨著培養基成分的破壞。因此必須選擇既能達到**目的。使用減血清培養基減少了實驗中血清帶來的變異性。陜西減血清培養基一般多少錢

無酚紅培養基在細胞實驗中減少了干擾因素。江蘇F12培養基答疑解惑

    生產上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預先已經**過的罐內。(四)、間歇**與連續**的比較1、歇**的***和缺點***是設備要求低,不需另外設置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動操作,適合于小批量生產規模;適合于含有大量固體物質的培養基的**。缺點是培養基的營養物質損失較多,**后培養基的質量下降;需進行反復的加熱和冷卻,能耗較高;不適合于大規模生產過程的**;發酵罐的利用率較低。2、連續**的***和缺點***是**溫度高,可減少培養基中營養物質的損失;操作條件恒定,**質量穩定;易于實現管道化和自控操作;避免了復的加熱和冷卻,提高了熱的利用率;發酵設備利用率高。缺點是對設備的要求高,需另外設置加熱、冷卻裝置;操作較麻煩;染菌的機會較多;不適合于含大量固體物料的**;對蒸汽的要求高。由此可見,無論在理論上或者在實踐上,與間歇**過程相比,連續**的***十分明顯。因此,連續**越來越多地被用培養基的**。江蘇F12培養基答疑解惑