1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方（g/L）天然培養基指來自動物體液或利用**分離提取的一類培養基，如血漿、血清、***、雞胚浸出液等。其***是營養成分豐富，培養效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前***使用的天然培養基是血清，另外各種**提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。減血清培養基減少了血清成分的變異性。河南Ham's F12培養基產品介紹

    將蒸過的原料置于室溫下過夜，未被殺死的孢子便發芽生長，芽孢發育成營養細胞，再30min便可殺死。如此連續反復進行2-3次，亦可達到徹底**的目的。3、分批**的操作分批滅歇是在所用的發酵罐或其他培養裝置中進行的，它是在配制罐中配好培養基后，通過**管道輸入發酵罐等培養設備中，然后開始**。在進行培養基的間歇**之前，通常先將發酵罐等培養裝置的分空氣過濾器進行**，并且用空氣將分過濾器吹干。開始**時，應先放去夾套或蛇管中的冷水，開啟排氣管閥，通過空氣管向發酵罐內的培養基通入蒸汽進行加熱，同時，也可在夾套內通蒸汽進行間接加熱。當培養基溫度升到70℃左右時，從取樣管和放料管向罐內通入蒸汽進一步加熱，當溫度升至120℃，罐壓為1*105Pa（表壓）時，打開接種、補料、消泡劑、酸、堿等管道閥門進行排汽，當然在保溫過程中，應注意凡在培養基液面下的各種進口管道都應通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道則應排放蒸汽，這樣才能不留死角，從而保證**徹底。保溫結束后，依次關閉各排汽、進汽閥門，待罐內壓力低于空氣壓力后，向罐內通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷水降溫，使培養基的溫度降到所需的溫度，進行下一步的發酵和培養。陜西Ham's F12培養基價格對比無血清培養基適用于敏感細胞系的培養和研究。

    式中：N0—開始**（t=0）時原有活菌數；Nt----經時間t后殘存活菌數。k：意義同上；t：表示理論**時間k=（）logNt/N0；比死亡速率常數K，K值大，表明微生物容易死亡。理論**時間的計算需要注意以下幾個問題：（1）K值因不同的微生物種類不同、不同的生理狀態、不同的外界環境，差別很大，實質上，它是微生物熱阻的一種表示形式，微生物的熱阻越大，K值也越小。可以取耐熱性芽孢桿菌的K進行計算。(2)在計算過程中，N0，Nt如何取值？N0為**開始時培養基中活微生物數，可以參考一般培養基中的活微生物數為（1-2）×107個/ml；Nt通常取，既**失敗的概率為千分之一。（3）上述**時間，通常稱之為理論**時間，只可以用于工程計算中，在實踐過程中，因蒸汽的壓力問題（不穩定）、蒸汽的流量問題有很大差別，甚至培養基中的固體顆粒的大小、培養基的粘度等因素，都會影響**效果，實際的設計和操作計算時間可作適當比例的延長或縮短。在實際生產中，通常采用經驗數值：間歇**，121℃，20—30分鐘；連續**，137℃，15—30s，在維持罐中保溫8—20分鐘。4、**溫度的選擇在培養基**過程中，除了雜菌死亡，還伴隨著培養基成分的破壞。因此必須選擇既能達到**目的。

    mgso4·7h2o20-200mg/l，2-羥基乙胺10-50mg/l，cecl31-20mg/l，mnso4·h2o1-10mg/l，feso4·7h2o1-10mg/l，vb15-50mg/l，生物素1-10μg/l；將各原料攪拌均勻后，調節ph為6-7，121℃**，自然冷卻，制得發酵培養基a。更推薦地，所述發酵培養基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調節ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發酵培養基a。推薦地，所述發酵培養基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸1-10g/l，尿素1-5g/l，殼聚糖20-100mg/l；將各原料攪拌均勻后，調節ph，**，制得發酵培養基b；更推薦地，所述發酵培養基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調節ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發酵培養基b。與現有技術相比，本發明取得的有益效果主要包括但是并不限于以下幾個方面：本發明發酵培養基采用兩部分組成，發酵培養基a側重于菌株增殖的提升，發酵培養基b側重于谷氨酸的合成和分泌；前期細胞增殖時。RPMI1640培養基確保了細胞的高效生長。

    維持15-20分鐘，可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**，如普通培養基、生理鹽水、手術敷料等。（二）下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗證方法高壓蒸氣**器使物品**后達到無菌要求，這是**實驗中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實驗成敗的**基礎**關鍵的首要步驟。除少數培養基只需加熱溶解，不需高壓**外，大部分培養基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養基**不徹底，直接關系到對**的無菌試驗結果。因此必須認真對高壓**器進行**效果的驗證。為此我們提供了進行**效果驗證的一個簡易可行的方法。1．試驗材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃壓力蒸氣**化學指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培養基116℃高壓**20分鐘后備用。(4)O—150℃留點溫度計。2．方法與結果將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡稱菌片）用無菌鑷子放人密封試管中。化學指示卡和留點溫度計放入敞口試管中。以上兩種試管各準備5-10份。分別放置在高壓**器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如**器為二層，則需放10處。減血清培養基減少了實驗中的血清干擾。浙江RPMI1640培養基價格信息

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    這些重組蛋白和動物來源成分對生物制品的安全性有很大影響。成本低。主要用途應用案例采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM（SLM）低血清培養基分別培養Vero細胞、BHK21細胞和CHO細胞，新生牛血清用量可以從10％降至3％，減少新生牛血清使用批次和批間差的影響，減少生物制品純化損失，減少由于不確定蛋白或者其它血清組分帶來干擾和差異的風險，提高制品安全性。低血清培養基可以在方瓶、3L轉瓶、15L轉瓶及生物反應器中培養細胞，在*苗生產中可以達到低血清高密度的培養效果。低血清培養基營養成分優于基礎培養基，易使細胞增殖迅速，代謝旺盛，代謝產物對細胞有不良影響，易產生細胞老化脫落現象。因此需要適當增加換液次數，增加傳代頻率。獲取同樣的細胞量，用低血清培養基將比用傳統培養基縮短近1/3的時間，可提高生產效率。采用199(SLM)低血清培養基培養Vero細胞分泌狂犬*苗病毒，滴度明顯高于采用199培養基傳統培養獲得的滴度。采MEM(SLM)低血清培養基BHK21細胞，在本實驗情況下12代內細胞形態和致密度均優于MEM培養基傳統培養情況，因而可以預期其產生的口蹄*、甲肝等*苗生產的病毒產量將提高。低血清培養基用于反應器Vero細胞狂犬*苗的生產，實踐證明效果良好。采DMEM。河南Ham's F12培養基產品介紹