所以做過強檢的**器還必須進行**效果的驗證。一些單位常常忽略了這個重要的問題。國內市售的手提**器，往往儀器指針達到所需的溫度，但**物品的實際溫度卻未達到要求。導致**物品不徹底，影響實驗結果。培養基**不徹底，影響培養基的使用及結果判斷。因此高壓蒸氣**器無菌效果的驗證是一個必須引起重視的問題。（三）**時的注意事項使用高壓蒸氣**器時，首先應注意在開放蒸氣的同時，排除**器內的冷空氣。必須將器內冷空氣全部排除后，才可關閉排氣孔。假如**器內仍存留有部分空氣時，剛壓力表上雖已達到了某一壓力值，但器內之溫度仍未達到相應之度數。存留的空氣越多，剛二者相差也越大。差也越大，器內溫度不足，**則不徹底。表蒸汽壓力與溫度的關系蒸汽壓力（kPa）密度（kg/cm2）溫度（℃）1126表高壓蒸汽**器中溫度與冷空氣排出量的關系蒸汽壓力（kPa）所達溫度。F12培養基在細胞分化研究中表現優越。江蘇無血清培養基價目表

    愈傷**誘導率為100％。如圖6所示。對比培養例6：將cs基本培養基替換為ms基本培養基，其余完全同培養實例6，ms基本培養基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養基的誘導結果為：本氏***葉片愈傷**誘導時，培養15-18d的葉片略微增厚，在葉片四周產生較少的淡綠色愈傷**，愈傷**誘導率為90％，在愈傷**團塊上產生的嫩綠色不定芽數量較少；本氏***根愈傷**誘導時，培養9-11d在切口處產生大量淡黃色致密的愈傷**，愈傷**誘導率為100％。如圖6所示。培養實例6和對比培養例6的誘導結果比較：用上述方法進行本氏***葉片愈傷**誘導時，cs誘導培養基愈傷**誘導率為100％，而ms誘導培養基的誘導率*為90％，在所述相同培養條件下，與ms誘導培養基相比，cs誘導培養基可更快誘導出大量致密的葉片愈傷**、產生更多的不定芽；用上述方法進行本氏***根愈傷**誘導時，cs誘導培養基與ms誘導培養基誘導出的根愈傷**形態相近，兩種培養基的根愈傷**誘導率均為100％。如圖6所示。培養實例7：水稻成熟胚愈傷**誘導(1)水稻種子消毒及篩選：a、選種：以秈稻縉恢10號為例，將水稻種子晾曬干燥后于4℃下長期保存，挑選籽粒飽滿、大小基本一致的水稻種子，用剪刀從種子中部剪開，去除谷殼。安徽Ham's F12培養基供應商F12培養基提供了豐富的營養成分，支持細胞的快速增殖。

    擬南芥根愈傷**誘導時，培養6-9d在切口處開始出現少量顆粒狀愈傷**，培養20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**，在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％。如圖5所示。培養實例5和對比培養例5的誘導結果比較：用上述方法進行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導時，cs誘導培養基與ms誘導培養基的顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％，但cs誘導培養基的愈傷**出愈時間比ms誘導培養基提前至少1d；在相同培養條件下，與ms誘導培養基相比，經cs誘導培養基誘導的葉片團塊狀愈傷**更大、誘導的根愈傷**更多。如圖5所示。培養實例6：本氏***葉片及根愈傷**誘導培養實例6與培養實例5不同的地方在于，步驟(1)將；步驟(2)將2,；步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片，用手術剪刀將無菌葉片剪成，用鑷子將其平鋪于誘導培養基；步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根，cs誘導培養基的誘導結果為：本氏***葉片愈傷**誘導時，培養15-18d的葉片明顯增大增厚，葉片四周產生大量的淡綠色致密的愈傷**，愈傷**誘導率為100％，且在愈傷**團塊上已開始產生多個嫩綠色的不定芽；本氏***根愈傷**誘導時，培養9-11d在切口處產生大量淡黃色致密的愈傷**。

    第三節**的代謝與培養基新陳代謝(metabolism)足生物有機體基本的特征之一，是生命活動中一切生化反應的總稱。它包括物質的分解和物質的合成過程。**吸收了外界的營養，在酶的作用下將其分解，再在酶的作用下臺成**菌體的成分。分解與合成兩個過程伴同發生，緊密相關，維持了**細胞的生命，進行**的生長。通過檢測**系統及代謝產物的生理，來鑒定**的試驗稱生化試驗。生化試驗可分為糖代謝試驗、蛋白質代謝試驗、鹽利用試驗和呼吸酶類斌驗4種。l.代謝試驗①氧化發酵試驗O-F；②糖（醇）類發酵試驗；③VP和甲基紅試驗2.蛋白質代謝試驗①蛋白水解試驗；②硫化氫試驗；③吲哚試驗；④脫羧酶試驗；③脫氨試驗；⑥尿素酶試驗。3.鹽類代謝試驗①枸櫞酸鹽試驗；②丙二酸鹽利用試驗；③硝酸鹽還原試驗4．呼吸酶類試驗①氧化酶試驗；②細胞色素氧化酶試驗表IMVIC試驗對腸桿菌屬的鑒別作用菌名吲哚（I）甲基紅（M）VP（Vi）枸櫞酸鹽。無酚紅培養基確保了實驗結果的準確性。

    二氧化碳不斷被釋放，培養液變酸，pH值發生變化。酚紅是細胞培養基中**常用的pH指示劑，但依靠細胞培養基中的酚紅等pH指示劑進行判斷，需要實驗員的經驗積累，存在較大的主觀性。實際上，個性化細胞培養基或是無血清細胞培養基中酚紅含量較少或是不含酚紅，只能通過pH計或者pH電極進行pH值的檢測，結果更為準確可靠。緩沖能力細胞培養基應具有一定的緩沖能力。細胞培養過程中造成細胞培養液pH波動的主要物質是細胞代謝產生的CO2。在封閉式培養過程中CO2與水結合產生碳酸，細胞培養液pH很快下降；打開培養器具時CO2逸出則會引起pH升高。細胞培養基通常采用NaHCO3-CO2緩沖系統，按下列化學反應方程式調節細胞培養基的pH值：H2O+CO2→H2CO3?H++HCO3－NaHCO3?Na++HCO3－此外，還有緩沖能力較高的磷酸鹽緩沖系統。但碳酸鹽緩沖系統的細胞毒性小、成本低，在細胞培養中應用得更為***。另一種較為常用的緩沖液是HEPES（羥乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一種非離子兩性緩沖液，在pH~。高濃度的HEPES可能對細胞**性作用，細胞培養時HEPES的添加濃度一般為10～25mmol/L。滲透壓細胞必須生活在等滲的環境中，大多數體外培養的細胞對滲透壓有一定耐受性。研究顯示。DMEM培養基提供了適宜的pH值和滲透壓。貴州培養基報價

MEM培養基含有多種必需的營養成分和礦物質。江蘇無血清培養基價目表

    參與細胞的代謝活動。此外，通過提供鈉，K+和Ca2+，幫助細胞調節細胞膜功能。Na+是細胞外液中**主要的陽離子，對維持滲透壓的恒定有決定性的作用，還與Cl－共同參與生物電活動、維持水平衡和酸堿平衡等。K+主要分布在細胞內液，對于***某些酶是必需的，并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+和Mg2+主要參與信號傳導、能量代謝、脂肪酸合成、核糖體穩定和蛋白質合成等多種生理作用。PO43－、SO42－、HCO3－是基質所需陰離子，同時是細胞內電荷的調節者。磷對于細胞的生長、代謝和調控都有重要的作用，含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白質是構成細胞的主要成分，ATP、ADP是能量生成、存儲和利用的不可或缺的化合物。上述離子對于細胞的作用各有不同，它們共同構成了細胞賴以生存的滲透壓、pH和電化學平衡的微環境，細胞對于某種元素的吸收利用會受到其它元素的干擾，例如培養基中過高的鈣離子濃度會使鎂和鋅的吸收利用受到干擾。因此，在保證培養基中上述離子濃度滿足要求以外，還需保證上述離子之間種類和比例的平衡。此外，微量元素如鐵、鈷、鎳、硒、碘、銅、鋅、錳、鉻、鉬、氟等對于細胞生長代謝和產物合成都有促進作用。江蘇無血清培養基價目表