品名:0.25%胰蛋白酶溶液,1X分類:細胞消化試劑規格:100ML用途:消化試劑,如胰蛋白酶,被用于將粘附細胞從其附著的表面或底物上分離和降解,以及將組織進行游離,以開展原代細胞培養。產品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶(1:250)以及一種新型非哺乳動物豬胰蛋白酶替代品,稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液,可以快速消化,同時不損傷細胞。其非哺乳動物配方使它適用于無血清應用,不需要失效或對酶抑制劑。此試劑可使細胞被快速分離,形成單細胞懸浮物,保持高細胞活力,并使傳代時的變異減至**小。在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。新疆胰酶
細胞培養的優點:1.研究的對象是活細胞在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。4.研究內容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。新疆胰酶胰蛋白酶溶液作為細胞分離試劑廣泛應用于貼壁細胞的連續培養。
1、胰酶是,就是說PBS,注意,盡量不要用水來溶,因為要保持滲透壓。2、EDTA的工作液溶度是-,根據細胞消化的難易程度自己調整。EDTA并不是必須的,容易消化的細胞可不加。EDTA對細胞貼壁性有影響,因此使用時要甚重。如果影響貼壁,但消化時必須要用,那么在用完全培養基終止消化后,可離心棄上清,再加完全培養基培養,可去除EDTA。如果對貼壁沒影響,那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可終止胰酶的作用,但不能終止EDTA的作用,對有些細胞來說,終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時候**易溶解,在配制時可先滴幾滴NaOH將pH調至8,注意,胰酶可使溶液變酸,所以要邊溶邊測pH,隨時調整。注意,不可加過量NaOH,否則過堿,細胞會受不了。6、胰酶EDTA相對比較難溶,可用磁力攪拌器,或放入4度冰箱過夜,待溶解后過濾**。7、可配2-3乘的胰酶,這樣比較節約時間和濾器,用的時候對上**PBS即可。8、儲存液放在-20度冰箱凍存,使用液放在4度,用的時候不要放在27度水浴鍋溫浴,因為這樣會讓胰酶很快失效,使用前放在室溫下一會。
細胞傳代消化時所用胰酶的濃度越高是越好 貼壁細胞的消化: 常用的消化方法主要有酶消化法、離子螯合劑、物理法和冷凍法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法:貼壁干細胞酶消化傳代時通常采用兩種方式:1、加入胰酶等干細胞脫落后,再加培養基中止胰酶作用,離心傳代;2、加入胰酶后,鏡下觀察待干細胞開始脫落時,棄去胰酶,加入培養液并分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對干細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的干細胞先脫落。EDTA是一種化學螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細胞分離。
胰酶消化貼璧細胞原理胰酶是一種重要的消化酶,它在人體消化過程中起到了關鍵作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能夠幫助人體消化食物中的蛋白質、脂肪和碳水化合物等營養物質。而胰酶消化貼壁細胞則是指胰酶在消化過程中與腸道內的貼壁細胞發生作用的機制。胰酶消化貼壁細胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三個過程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺內的特殊細胞合成的。這些細胞受到胃內食物的刺激后,通過胰腺神經末梢的刺激而開始合成和分泌胰酶。合成的胰酶經過胰管進入小腸。接下來是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通過胰腺分泌液的產生和排泄來實現。當胃內食物通過幽門進入小腸后,小腸壁上的細胞會分泌一種叫做胃腺素的物質,這種物質能夠刺激胰腺分泌液的分泌。胰腺分泌液中含有胰酶和其他消化酶,它們經過胰管進入小腸,與食物中的營養物質發生作用。***是胰酶的作用。胰酶主要通過兩種方式作用于貼壁細胞。一種方式是直接作用,胰酶直接與貼壁細胞接觸并發揮作用。另一種方式是間接作用,胰酶作用于食物中的營養物質,將其分解為小分子物質后再與貼壁細胞發生作用。 胰酶使用的時候要注意什么?江蘇國產胰酶哪家便宜
消化液經過過濾除菌,可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化。新疆胰酶
胰酶的作用原理是什么呢?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細胞膜上和培養皿結合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時細胞在自身內部細胞骨架的張力以及培養液表面張力的作用下成為球形。使用胰酶時需注意哪些細節問題?在使用胰酶(Trypsins)細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差,做流式時的CDMarker也可能會下降。胰酶進行分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時液體體積會膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復凍融會降低消化效果并可能造成污染。胰酶適用于消化細胞間質較少的軟組織和傳代細胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對于纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關。新疆胰酶