隨著技術的發展,雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優化,結合它的特點,大致可以分成深和活兩個方面的提升。要想讓激發激光進入更深的層面,大致可從兩個方面入手,裝置優化與標本改造。關于裝置優化,我們可以把激光束變得更細,使能量更加集中,就能讓激光穿透更深。關于標本,其中影響光傳播的主要是物質吸收和散射,解決這個問題,我們需要對樣本進行透明化處理。一種方法是運用某種物質將標本浸泡,使其中的物質(主要是脂質)被破壞或溶解。另一種方法是運用電泳將脂質電解,進而讓標本“透明度”提高。雙光子顯微鏡型號有哪些?美國布魯克雙光子顯微鏡廠家
雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發技術的一種新技術。雙光子激發的基本原理是:在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子,在經過一個很短的所謂激發態壽命的時間后,發射出一個波長較短的光子;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發熒光分子是相同的。雙(多)光子成像優勢在于,具有更深的組織穿透深度,利用紅外光,能夠在層面檢測極限達1mm的組織區域;因信號背景比高,而具有更高的對比度;因激發體積小,具有定點激發的特性,具有更少的光毒性;激發波長由紫外、可見光調整為紅外激發,能夠更加地安全。進口布魯克雙光子顯微鏡價位由于雙光子顯微鏡使用的是可見光或近紅外光作為激發光源,適用于長時間的研究。
雙光子顯微鏡是一種先進的成像技術,可以在保持細胞活性的情況下,對深層組織進行高分辨率成像。它主要用于生物學、醫學和材料科學等領域的研究。雙光子顯微鏡的重心技術是基于雙光子激發的熒光成像。當激光通過樣品時,它會吸收特定波長的光子,然后發出熒光。雙光子顯微鏡使用兩個連續的光子同時激發樣品,這樣可以在保持樣品完整性的同時,獲得高質量的圖像。雙光子顯微鏡具有以下優點:1.高分辨率:由于雙光子激發的特性,它可以獲得比傳統顯微鏡更高的分辨率。2.深層成像:由于激光的穿透深度限制,傳統的光學顯微鏡無法對深層組織進行成像。而雙光子顯微鏡可以解決這個問題,因為它可以激發樣品的深層熒光。3.活細胞成像:雙光子顯微鏡可以在保持細胞活性的情況下進行成像,這對于研究細胞生理學和生物化學過程非常有用。4.多模式成像:雙光子顯微鏡可以結合多種技術,如光譜成像、鈣離子成像和神經活動成像等,以提供更豐富的生物樣品信息。總之,雙光子顯微鏡是一種強大的研究工具,可以對深層組織和活細胞進行無損成像。這使得它在生物學、醫學和材料科學等領域的研究中具有廣泛的應用。
雙光子技術在醫療診斷應用中具有巨大的潛力,該領域還未形成標準和體系,還仍需要系統的醫學研究與龐大的醫療數據加以支撐,通過研究人體基于多光子成像技術,進行細胞結構、生化成分、微環境、組織形態、代謝功能的影響信息,找到與疾病的細胞學、分子生物學、組織病理學、診斷和特征的關聯關系,共同探究生理病理基礎和分子細胞生物學機制,篩選鑒定、皮膚病、自身免疫病及其他疑難疾病的診斷及鑒別診斷依據,建立全新的多光子細胞診斷的完整數據庫,定義出針對不同疾病的多光子臨床檢測設備的產品標準。討論環節,來自病理科、呼吸中心、心臟科、神經科、皮膚科及研究所的多位醫師及研究人員紛紛結合各自的工作領域與王愛民副教授展開了熱烈的討論,其中毛發中心楊頂權主任計劃再次邀請王愛民副教授進行學術交流。通過本次學術交流,病理科與研究所分別與王愛民副教授課題組達成了初步的合作意向。雙光子顯微鏡將得到更大的發展與更廣的應用。
WinfriedDenk使用的第1個光源是染料飛秒激光(脈沖寬度100fs,可見光波長630nm)。染料激光雖然實驗室演示可以接受,但是使用起來不方便,所以離商業化還很遠。很快雙光子顯微鏡的標準光源變成了飛秒鈦寶石激光器。鈦寶石激光器除了具有固態光源的優點外,還具有近紅外波長調諧范圍寬,而近紅外比可見光穿透更深,對生物樣品的損傷更小。下圖是Thorlabs的雙光子和三光子顯微鏡配置,鈦寶石飛秒可調諧激光器位于平臺左側。從雙光子到三光子科學家們正在從雙光子顯微鏡轉向三光子顯微鏡。1996年,ChrisXu在康奈爾大學(Denk的導師實驗室)讀博時發明了三光子顯微鏡。如果雙光子吸收是可行的,那么三光子似乎是自然的發展方向。三光子成像使用更長的波長,大約1.3和1.7微米,成像深度比雙光子更深。目前錄音大約2.2毫米,人的大腦皮層厚度大約4毫米。與雙光子顯微鏡相比,三光子需要使用更強、更短、重復率更低的激光脈沖,這是傳統的鈦寶石激光器很難滿足的,但對于摻鐿光纖飛秒光參量放大器,比如我們的Y-Fi光參量放大器(OPA)就非常容易。雙光子顯微鏡在組織透明化成像中應用。美國布魯克雙光子顯微鏡廠家
如果已經有了飛秒光,就可以幾套雙光子顯微鏡共享一臺,只需分光即可。美國布魯克雙光子顯微鏡廠家
TOPTICAFemtoFiberultra920超快光纖激光器是一種易于操作和免維護的激光系統其輸出波長為920nm,非常適合常規熒光基團(如GFP、eGFP、曙紅、GCaMP、CFP、鈣黃綠素或金星)的雙光子激發。它可以為熒光基團提供相對較高的峰值功率,常用于神經科學和其他與激光相關的光子學。此外,其獨特的設計(簡單和經濟的光源)具有創新雙光子熒光顯微鏡發展的潛力。在雙光子顯微鏡中,峰值功率就是亮度!如果你想獲得更好的圖像亮度,那么你需要短脈沖,高功率,更重要的是,干凈的時間脈沖形狀。FemtoFiberultra920具有足夠高的輸出功率、短脈沖、獨特的Clean-Pulse技術和相對較高的峰值功率,這使得在雙光子顯微鏡中實現****亮度而無需對樣品進行不必要的加熱成為可能。FemtoFiberultra920全包式、完全集成的色散補償(可確保樣品處的短脈沖)、內置電源控制、直觀的操作及其堅固緊湊的設計使系統具有非常友好的用戶體驗,是非線性顯微鏡應用的良好解決方案。例如,熒光蛋白的雙光子激發和基于SHG的對比機制美國布魯克雙光子顯微鏡廠家