離子選擇性(selectivity)(大小和電荷)∶某一種離子只能通過與其相應的通道跨膜擴散(安靜∶K>Na100倍、興奮;Na>K10-20倍);各離子通道在不同狀態下,對相應離子的通透性不同。門控特性(Gating)∶失活狀態不僅是通道處于關閉狀態,而且只有在經過一個額外刺激使通道從失活關閉狀態進入靜息關閉狀態后,通道才能再度接受外界刺激而***開放。離子通道的功能(FunctionoflonChannels)1.產生細胞生物電現象,與細胞興奮性相關。2.神經遞質的釋放、腺體的分泌、肌肉的運動、學習和記憶3.維持細胞正常形態和功能完整性膜離子通道的基因變異及功能障礙與許多疾病有關,某些先天性與后天獲得性疾病是離子通道基因缺陷與功能改變的結果,稱為離子通道病(ionchannelpathies)。一些學者建立了組織切片膜片鉗技術(Slicepatch),就能在哺乳動物腦片制備上做全細胞記錄。德國腦片膜片鉗多少錢
1976年德國馬普生物物理化學研究所Neher和Sakmann在青蛙肌細胞上用雙電極鉗制膜電位的同時,記錄到ACh的單通道離子電流,從而產生了膜片鉗技術。1980年Sigworth等在記錄電極內施加5-50cmH2O的負壓吸引,得到10-100GΩ的高阻封接(Giga-seal),明顯降低了記錄時的噪聲實現了單根電極既鉗制膜片電位又記錄單通道電流的突破。1981年Hamill和Neher等對該技術進行了改進,引進了膜片游離技術和全細胞記錄技術,從而使該技術更趨完善,具有1pA的電流靈敏度、1μm的空間分辨率和10μs的時間分辨率。1983年10月,《Single-ChannelRecording》一書問世,奠定了膜片鉗技術的里程碑。Sakmann和Neher也因其杰出的工作和突出貢獻,榮獲1991年諾貝爾醫學和生理學獎。日本全細胞膜片鉗電生理工具細胞是動物和人體的基本組成單元,細胞與細胞內的通信,是依靠其膜上的離子通道進行的。
1937年,Hodgkin和Huxley在烏賊巨大神經軸突細胞內實現細胞內電記錄,獲1963年Nobel獎1946年,凌寧和Gerard創造拉制出前列直徑小于1μm的玻璃微電極,并記錄了骨骼肌的電活動。玻璃微電極的應用使的電生理研究進行了重命性的變化。Voltageclamp(電壓鉗技術)由Cole和Marmont發明,并很快由Hodgkin和Huxley完善,真正開始了定量研究,建立了H一H模型(膜離子學說),是近代興奮學說的基石。1948年,Katz利用細胞內微電極技術記錄到了終板電位;1969年,又證實N—M接觸后的Ach以"量子式"釋放,獲1976年Nobel獎。1976年,德國的Neher和Sakmann發明PatchClamp(膜片鉗)。并在蛙橫紋肌終板部位記錄到乙酰膽堿引起的通道電流。
1980年,Sigworth、Hamill、Neher等在記錄電極內施加負壓吸引,得到了10~100GΩ的高阻封接(gigaseal),降低記錄噪聲,實現了單根電極既鉗制膜電位又記錄單通道電流。獲1991年Nobel獎。1955年,Hodgkin和Keens應用電壓鉗(Voltageclap)在研究神經軸突膜對鉀離子通透性時發現放射性鉀跨軸突膜的運動很像是通過許多狹窄空洞的運動,并提出了"通道"的概念。1963年,描述電壓門控動力學的Hodgkin-Hx上模型(簡稱H-H模型)榮獲譜貝爾醫學/生理學獎。1976年,Neher和Sakmann建立膜片鉗(Patchclamp)按術。1983年10月,《Single-ChannelRecording》一書問世,奠定了膜片鉗技術的里程碑。1991年,Neher和Sakmann的膜片鋪技術榮獲諾貝爾醫學/生理學獎。維持細胞正常形態和功能完整性。
膜片鉗技術發展至今,已經成為現代細胞電生理的常規方法,它不僅可以作為基礎生物醫學研究的工具,而且直接或間接為臨床醫學研究服務。目前膜片鉗技術廣泛應用于神經(腦)科學、心血管科學、藥理學、細胞生物學、病理生理學、中醫藥學、植物細胞生理學、運動生理等多學科領域研究。隨著全自動膜片鉗技術(Automaticpatchclamptechnology)的出現,膜片鉗技術因其具有的自動化、高通量特性,在藥物研發、藥物篩選中顯示了強勁的生命力。膜片鉗80%的工夫在于刺備細胞。芬蘭高通量全自動膜片鉗產品介紹
膜片鉗記錄不但能夠在神經元胞體及其樹突上進行,而且可同時在這兩個不同的部位作膜片鉗記錄。德國腦片膜片鉗多少錢
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