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斑馬魚的胚胎發(fā)育過程極具研究價(jià)值。其胚胎在體外發(fā)育,并且在早期階段是透明的,這一特性使得研究人員能夠借助顯微鏡直接觀察到胚胎內(nèi)部細(xì)胞的分裂、分化以及各種organ的形成過程,猶如在一個(gè)天然的 “透明實(shí)驗(yàn)室” 中見證生命的孕育與成長。在受精后的 24 小時(shí)內(nèi),斑馬魚胚胎就已經(jīng)開始分化出多個(gè)胚層,隨后,心臟、神經(jīng)管、眼睛等重要organ逐漸形成,整個(gè)胚胎發(fā)育過程在較短時(shí)間內(nèi)完成,通常在 3 - 5 天內(nèi)幼魚即可孵化。這種快速而有序的發(fā)育模式為研究發(fā)育生物學(xué)的基本原理和機(jī)制提供了較好的機(jī)會。其肝臟在物質(zhì)代謝等方面承擔(dān)重要任務(wù)。斑馬魚熒光試劑生產(chǎn)公司
斑馬魚功效評價(jià)體系●基于表型對斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察,進(jìn)而評估功效,如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色、試劑盒等方法對功效進(jìn)行測試,如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量,也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實(shí)驗(yàn)●基于行為學(xué)通過對斑馬魚的運(yùn)動情況對一些功效進(jìn)行評價(jià),如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評價(jià)體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡斑馬魚保濕實(shí)驗(yàn)斑馬魚的鰓弓除了呼吸作用,還有其他生理功能。
在胚胎腦部雛形初現(xiàn)、脊髓尚在萌芽之際,Cdx 基因悄然發(fā)力。它間接調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞的增殖速率與分化方向,好似一位嚴(yán)苛的 “導(dǎo)師”,把控 “學(xué)生” 數(shù)量與 “專業(yè)” 走向,只為生成契合斑馬魚早期生存需求的神經(jīng)元群體。借助先進(jìn)的基因敲除與huo體成像技術(shù),科學(xué)家們洞察到,當(dāng) Cdx 基因表達(dá)失衡時(shí),斑馬魚幼魚瞬間陷入 “運(yùn)動困境”:游泳姿態(tài)怪異,頻繁原地打轉(zhuǎn)、毫無方向地側(cè)翻,仿若迷失在茫茫水域的孤舟。原來,脊髓內(nèi)運(yùn)動神經(jīng)元發(fā)育 “折戟”,軸突生長迷失方向,難以精細(xì)對接肌肉纖維,致使肌肉接收大腦指令時(shí) “一頭霧水”,收縮舒張雜亂無章。不僅如此,Cdx 基因還深度融入神經(jīng)回路的構(gòu)建流程,攜手其他神經(jīng)發(fā)育關(guān)鍵基因,精心鋪設(shè)從外界刺激感知、信號中樞處理,再到肌肉運(yùn)動響應(yīng)的信息 “高速路”,多方位保障斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)的高效、精細(xì)運(yùn)行。
儀器設(shè)備,是實(shí)驗(yàn)室功能的關(guān)鍵單元。在斑馬魚實(shí)驗(yàn)室設(shè)備領(lǐng)域,環(huán)特自主開發(fā)了10余類具備帶動競爭力的智能化設(shè)備。比如斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)、斑馬魚獨(dú)特成像系統(tǒng)、斑馬魚3D行為分析系統(tǒng)、斑馬魚2D行為分析系統(tǒng)、斑馬魚強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)儀、斑馬魚胚胎分裝系統(tǒng)、斑馬魚培養(yǎng)箱、斑馬魚臭氧干燥箱和斑馬魚高通量工作站等獨(dú)特儀器設(shè)備,大幅提升實(shí)驗(yàn)室運(yùn)營效率,加速技術(shù)成果產(chǎn)出。環(huán)特實(shí)驗(yàn)室已通過CNAS、CMA和AAALAC認(rèn)證,擁有實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)與使用許可證,自有8500m2實(shí)驗(yàn)室。環(huán)特實(shí)驗(yàn)室在技術(shù)研發(fā)與應(yīng)用領(lǐng)域,已牽頭起草發(fā)布團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)17項(xiàng),申請發(fā)明專利66項(xiàng),自主開發(fā)斑馬魚模型170多種,發(fā)表SCI及核心期刊論文220多篇,已有7個(gè)新藥項(xiàng)目成功將環(huán)特斑馬魚實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用于NMPA(國家藥監(jiān)局)的臨床試驗(yàn)申報(bào),累計(jì)完成項(xiàng)目8000多個(gè),長期合作客戶800多家。斑馬魚的壽命較短,一般為 2 - 3 年,利于世代研究。
初期,Cdx 基因像是精細(xì)的 “導(dǎo)航儀”,帶動細(xì)胞沿著特定分化路徑前行。它深度參與中胚層與內(nèi)胚層的早期分化抉擇,決定哪些細(xì)胞會投身于肌肉組織的鍛造,賦予斑馬魚幼魚靈動游弋的力量;哪些又將致力于腸道系統(tǒng)的搭建,保障營養(yǎng)的攝取與消化。當(dāng)科研人員巧妙運(yùn)用基因編輯技術(shù),特異性敲低斑馬魚的 Cdx 基因表達(dá)后,胚胎發(fā)育隨即陷入混亂:原本筆直修長的脊柱出現(xiàn)嚴(yán)重彎曲,好似坍塌的橋梁;尾部發(fā)育不全甚至近乎缺失,令幼魚喪失了在水中靈活轉(zhuǎn)向、快速推進(jìn)的能力;腸道更是 “潰不成軍”,絨毛結(jié)構(gòu)雜亂無章,蠕動功能癱瘓,營養(yǎng)吸收受阻。其體內(nèi)的色素細(xì)胞可使身體呈現(xiàn)出黑白相間的條紋。斑馬魚基因編輯標(biāo)準(zhǔn)
斑馬魚的尾鰭形狀對其游泳速度和方向控制有影響。斑馬魚熒光試劑生產(chǎn)公司
盡管斑馬魚實(shí)驗(yàn)具有諸多優(yōu)勢,但也存在一些局限性和挑戰(zhàn)。斑馬魚畢竟是一種低等脊椎動物,其生理結(jié)構(gòu)和代謝過程與人類存在一定的差異。例如,斑馬魚的肝臟和腎臟等organ的功能與人類不完全相同,這可能導(dǎo)致一些在斑馬魚實(shí)驗(yàn)中有效的藥物在人體臨床試驗(yàn)中效果不佳或出現(xiàn)不良反應(yīng)。因此,在將斑馬魚實(shí)驗(yàn)結(jié)果推廣到人類醫(yī)學(xué)應(yīng)用時(shí),需要謹(jǐn)慎評估和驗(yàn)證。在斑馬魚實(shí)驗(yàn)技術(shù)方面,雖然基因編輯等技術(shù)已經(jīng)較為成熟,但仍存在一些技術(shù)難題需要攻克。例如,在進(jìn)行基因敲除實(shí)驗(yàn)時(shí),可能會出現(xiàn)脫靶效應(yīng),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外,斑馬魚實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析和解讀也需要專業(yè)的知識和技能,如何從大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中提取有價(jià)值的信息,建立有效的數(shù)據(jù)分析模型,也是當(dāng)前斑馬魚實(shí)驗(yàn)研究面臨的一個(gè)挑戰(zhàn)。斑馬魚熒光試劑生產(chǎn)公司