培養基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。5、分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角瓶,較多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。培養基通常采用高壓蒸汽滅菌。不銹鋼內桶培養基制備器廠家
培養基的性能測試:外觀控制:制備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。污染控制:從每批制備好的培養基中選取部分進行污染測試(空白試驗),確定無微生物生長方可使用。同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,很終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。福建自動攪拌培養基制備器全自動培養基制備分裝系統:運行過程順滑無聲;大程度的削減了噪音。
微生物發酵培養基配制注意事項:①養分濃度和配比合適:微生物只有在培養基中養分濃度合適的情況下才能生長良好是合適的。當養分濃度過低時,不能滿足微生物正常生長的需要。②微生物培養基pH條件控制:培養基的pH必須控制在一定范圍內,以滿足不同種類微生物的生長繁殖或產生代謝物。各種微生物生長繁殖或代謝產物產生的較佳pH條件不同。通常細菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內生長,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內生長。③微生物培養基原料來源選擇:培養基配制時,應盡可能使用低廉易得的原料作為培養基成分。尤其在發酵行業,培養基用量大,使用成本較低原料實現產品附加價值。例如在微生物單細胞蛋白的工業化生產過程中,制糖業含蔗糖廢液、乳業含乳糖廢液、大豆廢液工業和黑色廢物、造紙工業中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經常被作為培養基原料使用。④成品培養基滅菌處理、為了獲得微生物的純培養物,必須避免被細菌污染,所以對使用的設備和工作場所進行消毒和消毒。對于微生物培養基要進行嚴格的滅菌處理。
培養基的過濾澄清:液體培養基必須較全澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。液體培養基:為確定液體培養基的生長率,應接種適當的培養物。
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。全自動培養基制備儀主要特點:滅菌-加熱-攪拌-混合-冷卻一體化控制。甘肅培養基制備器報價
紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,同時空氣受紫外線照射后產生微量臭氧,從而起共同殺菌作用。不銹鋼內桶培養基制備器廠家
配制培養基應遵循的幾個原則:1、目的明確:培養不同的微生物必須采用不同的培養條件;培養目的不同,原料的選擇和配比不同;2、營養協調:微生物細胞組成元素的調查或分析,是設計培養基時的重要參考依據,微生物細胞內各種成分間有一較穩定的比例。3、理化適宜:指培養基的pH值、滲透壓、水活度和氧化還原電勢等物理化學條件較為適宜。4、經濟節約:配制培養基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養基成份,特別是在發酵工業中,以降低生產成本。不銹鋼內桶培養基制備器廠家