微生物限度:細胞培養基不是無菌產品,其中的微生物在一定條件下會吸收細胞培養基中的營養物質滋生繁殖,導致細胞培養基變質失效。控制細胞培養基中細菌和霉菌,是延長細胞培養基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當地藥典》2005版二部附錄第100頁的口服給藥制劑的微生物限度標準,并嚴于該標準,規定細胞培養基產品的細菌數每1g不得超過200個,霉菌數每1g不得超過50個。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,混勻即得試樣。按中華人民當地藥典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進行,檢查項目為細菌數、霉菌數。檢查法采用平皿法。培養基由于富含營養物質,易被污染或變質。寧夏大容量 培養基制備器
固體斜面培養基配制:培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。新疆全自動培養基制備器培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。
基礎培養基各種微生物的營養要求雖不相同,但多數微生物需要的基本營養物質相同。按一般微生物生長繁殖所需要的基本營養物質配制的培養基即成為基礎培養基。牛肉膏蛋白胨培養基就是很常用的基礎培養基,它可作為一些特殊培養基的基本成分,再根據某種微生物的特殊要求,在基礎培養基中添加所需營養物質。根據培養基的特殊用途可分為基礎培養基、加富培養基、選擇培養基和鑒別培養基等。基礎培養基:含有細菌生長繁殖所需的基本營養物質,可供大多數細菌生長。在牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調節pH7.2~7.6,經滅菌處理后,即為基礎液體培養基;如再加入0.3%~0.5%的瓊脂,則為基礎半固體培養基;加入1%~2%的瓊脂,則為基礎固體培養基。牛肉膏蛋白胨培養基就是很常用的基礎培養基,它可作為一些特殊培養基的基本成分,再根據某種微生物的特殊要求,在基礎培養基中添加所需營養物質。
消毒與滅菌的區別:消毒指使用較為溫和的物理或化學方法單殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。培養酵母菌一般用麥芽汁培養基,培養霉菌則一般用查氏合成培養基。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基倒入平板,將滅菌溶化的培養基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養皿中。微生物培養基制備的溫度不能太高,否則培養皿內蓋容易形成過多的冷凝水;溫度太低,中海培養基容易凝固成塊狀,不能做成平板。倒平板時,要靠近酒精的火焰以防止外來細菌落入盤中。左手托住培養皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞,燒灼燒瓶口,用拇指和食指在培養皿蓋上打開一條縫,直到燒瓶口剛好伸手進去,倒入培養基,直到底部被覆蓋。不要超過培養皿高度的三分之一,迅速蓋上蓋子,放在桌子上,輕輕旋轉培養皿,使培養基分布均勻,凝結后即可。培養基制備器試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時候),勿使用橡皮塞。山東培養基滅菌 培養基制備器
培養基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻。寧夏大容量 培養基制備器
培養基的稱量和溶解:小心稱量所需量的脫水合成培養基(必要時佩戴口罩或在通風柜中操作,以防吸入含有有毒物質的培養基粉末),先加入適量的水,充分混合(注意避免培養基結塊),然后加水至所需的量后適當加熱,并重復或連續攪拌使其快速分散,必要時應完全溶解。含瓊脂的培養基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意:培養基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。寧夏大容量 培養基制備器