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山東瓊脂培養基 培養基制備器

來源: 發布時間:2023-12-12

三角培養瓶是細胞培養中的常用耗材,也可用于培養基的配制、混合及儲存。利用三角培養瓶制備培養基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角培養瓶,很多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。在配制培養基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養基成分。山東瓊脂培養基 培養基制備器

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培養基制備基本方法:培養基配方的選定,同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養基pH的初步調整,培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的很終pH,保證培養基的質量。pH調正后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。中國香港自動攪拌培養基制備器培養基制備器微生物細胞組成元素的調查或分析,是設計培養基時的重要參考依據。

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液體培養基:為確定液體培養基的生長率,應接種適當的培養物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養后,計數或計算液體培養基分數而得出其生長數量的。對于液體培養基定性測試方法,則通過肉眼觀察來實現。目標菌和非目標菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養基10mL/管待檢。接種目標菌:將少量測試菌株培養物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。接種非目標菌:將大量測試菌株培養物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。

培養基的分裝:培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基好終pH之用。培養基制備器滅菌鍋關閉放氣閥前,將鍋內氣體排干凈。

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微生物檢驗培養基制備的要點:培養基分裝,準備好的中.海培養基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一;瓊脂斜面不要超過試管長度的五分之一。滅菌后斜面應為培養基量的三分之一,底層應為培養基量的三分之二;半固態瓊脂的體積為三分之一;用于接種或保護細菌的高級瓊脂,分裝試管長度的三分之一和四分之一,接種厭氧菌的量應達到三分之二;瓊脂平板90毫米內徑13~15毫升,內徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水,可將平板倒置,置于37℃培養箱中三十分鐘,晾干后使用。每批培養基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中,與該批培養基同時滅菌,在以確定這批培養基的很終pH值。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。中國香港自動攪拌培養基制備器

固體培養基根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。山東瓊脂培養基 培養基制備器

制備的方法和注意事項:1培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。山東瓊脂培養基 培養基制備器