微生物培養基制備:溶解滅菌后,盤子上無不溶性結晶紫、無紫色斑;與未溶解和消毒的盤子相比,盤子上有結晶紫和紫色斑點。因此正確的步驟順序是在高壓滅菌前需要進行培養基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷卻至二十五度,確定pH值;對需要高壓滅菌的介質取平均值,高壓滅菌后冷卻至二十五度,這兩種狀況測量培養基pH值,固體培養基至少檢測兩個點,取它們的平均值??刂婆囵B基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養基在高溫環境中不要長時間存放。全自動培養基制備儀主要特點:不會產生氣泡。河北培養基消毒 培養基制備器
溶化:培養基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養基中不含有瓊脂,培養基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時攪動,防止焦化,如有焦化現象,配制的培養基就不能使用,要重新配制。配制培養基時不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會使培養基中的銅和鐵的含量超標,影響實驗(培養基中銅含量大于0.3mg/L,細菌不宜生長,鐵含量超過0.14mg/L,妨礙細菌產有害)。對容易發生反應,產生沉淀的藥品,要分開溶解,較后加入培養基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。天津培養基制備器多少錢制備培養基的操作要點:液體培養基所配制的培養基是液態的。
配制培養基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養物,培養基必須及時嚴格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養基,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長時間高溫滅菌也會使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產生沉淀。為了防止這類沉淀發生,可將這些物質分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡合物,防止沉淀的產生。高壓蒸汽滅菌一般使培養基pH降低,應在配制培養基時加以調節。
根據培養基的物理狀態來區分,可以分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。1)液體培養基所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。2)固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。3)半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。培養基制備器試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時候),勿使用橡皮塞。
培養基的脫氣:必要時,在使用前將養基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入前應冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養基的棄置:所有污染和未使用的培養基的棄置應采用安全的方式,并符合相關法律法規的規定。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基較終pH之用。在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時,常需在培養基中加入少量螯合劑。不銹鋼內桶培養基制備器價格
低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養基時要掌握營養物質的濃度。河北培養基消毒 培養基制備器
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養基制備器中進行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養基按食品微生物學檢驗標準中的規定進行滅菌。培養基體積不應超過1000mL,否則滅菌時可能會造成過度加熱。所有的操作應按照標準或使用說明的規定進行。滅菌效果的控制是關鍵問題。加熱后采用適當的方式冷卻,以防加熱過度。這對于大容量和敏感培養基十分重要,例如含有煌綠的培養基。過濾除菌:過濾除菌可在真空或加壓的條件下進行。使用孔徑為0.2μm的無菌設備和濾膜。消毒過濾設備的各個部分或使用預先消毒的設備。一些濾膜上附著有蛋白質或其他物質(如物品),為了達到有效過濾,應事先將濾膜用無菌水潤濕。河北培養基消毒 培養基制備器
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