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平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)

來源: 發布時間:2023-12-22

天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適于用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如。高氏1號培養基和查氏培養基等。合成培養基有一定的配方,配制合成培養基時重復性強,但與天然培養基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。Hugh-Leifson培養基(O/F試驗用)HL培養基 葡萄糖銨培養基 營養半固體瓊脂(NSA) Rustigian氏尿素培養液。平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)

培養基

培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不只不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中,培養基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。再如,在維生素發酵生產過程中,可以通過控制培養基中碳源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與維生素的合成協調。B5培養基(不含蔗糖和瓊脂)如果細菌的生長受到限制,可以嘗試調整培養基的成分或添加輔助物質,例如控制培養基中氧氣的含量。

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基礎培養基:含有基礎生長所需的基本營養成分,較常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基礎培養基普遍用于細菌的增菌、檢驗,也是制備其他培養基的基礎成分。營養培養基:在基礎培養基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。較常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。特殊培養基:包括厭氧培養基和細菌L型培養基等。前者是培養專性厭氧菌的培養基,除含營養成分外,還加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢,如皰肉培養基、巰基乙醇酸鈉培養基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內滲透壓較高,故培養基必須采用高滲低瓊脂培養基。

對于已經購買來的預裝培養基,其內部較初的狀態已經是無菌的。因此,在通常情況下,我們不需要對新的預裝培養基進行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前,檢查預裝培養基瓶口是否無菌,便可以直接使用。在使用過程中,應當嚴格遵守實驗室操作規范,避免外界微生物的污染。對于需要自制的培養基而言,其情況也不盡相同。如果自制的培養基中包含天然成分,那么在自制之后就需要進行消毒處理,以殺死培養基中可能存在的微生物。在消毒處理之后,再將培養基裝入瓶中,就可以進行進一步的實驗使用。同時,在使用自制的預裝培養基時,需要嚴格控制其培養溫度、培養時間、以及實驗環境等參數,以保證實驗結果的準確性。培養基的配方也會受到環境、藥物和其他外部壓力的影響,因此,在實際應用中需要不斷進行調整和改進。

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干粉培養基的保存和注意事項:干粉培養基的儲存條件應保持干燥、防潮、防曬,并存放于陰涼干燥處,避免受到光線、溫度、濕度等外界環境的影響。一旦開封,干粉培養基應立即密封并放回原包裝中,以免受到環境中的污染和變質。在使用干粉培養基時,應注意其有效期和使用方法。有效期是指干粉培養基在儲存條件下能夠保持理想品質的時間,一般為 2 年至數年不等。在該期限內使用的干粉培養基能夠保證培養實驗的有效性和可重復性。同時,使用干粉培養基時應遵循無菌操作的原則,注意消毒、凈化和防止污染,保證實驗結果的準確和可靠。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養基為營養瓊脂平板培養基。胰蛋白胨酵母浸粉肉湯

培養基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術,避免細菌交叉污染。平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)

對于預裝培養基的儲存溫度應該是在 4℃ 到 8℃ 的范圍內。這是因為預裝培養基中含有大量的營養物質,這些物質在常溫下很容易被微生物利用,從而失去營養價值。同時,4℃ 到 8℃ 的溫度可以有效地防止微生物的生長和繁殖,從而保證培養基的質量和效果。對于預裝培養基的儲存條件應該是“干燥、陰涼、避光和密封”。這是因為預裝培養基中含有一定比例的水分,如果儲存條件不當,就會導致微生物的生長和繁殖,從而影響實驗結果的準確性。因此,我們需要選擇干燥、陰涼、避光和密封的地方進行存儲。在存儲時,應該避免陽光直射、潮濕和高溫的環境,以免影響預裝培養基的質量和穩定性。同時,在儲存過程中,應該注意避免磕碰和摔落,提高預裝培養基的存儲安全性。平板計數瓊脂(PCA)標準方法瓊脂(SA)