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七葉苷培養基

來源: 發布時間:2023-05-26

培養基的pH必須控制在一定的范圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的較適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累,會導致培養基pH發生變化,若不對培養基pH條件進行控制,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。因此,為了維持培養基pH的相對恒定,通常在培養基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物,培養基pH不會過度降低;如果培養基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物,培養基pH也不會過度升高。液體培養基、固體培養基和半固態培養基是常用的培養基種類。七葉苷培養基

培養基

在培養基中加入 HEPES 有何好處?培養基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營養,但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強的緩沖劑,能使細胞培養基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養基pH迅速變動。在開放式培養條件下,觀察細胞時培養基脫離了 5%CO2 的環境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進行克隆化培養時要添加HEPES。神經細胞原代培養的過程中能用到。胡蘿卜培養基 胡蘿卜浸出液葡萄糖培養基在有些情況下,培養基還需要進行一些化學處理。

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上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,厭氧菌培養基(anaerobic media) 供厭氧菌的分離、培養和鑒別用的培養基,稱為厭氧菌培養基。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,如細胞色素和細胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶、超氧化歧化酶,所以造成自身代謝的缺陷,無法進行有氧代謝,而無氧酵解所產生的能量又不足,因此厭氧菌在正常的大氣環境下不能生長和生存。為使厭氧菌能正常生長,必須制備營養成分豐富,氧化還原電勢較低,具有特殊生長因子的專門用的培養基。

合成培養基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養物質組成的培養基。根據微生物對營養要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴格操作,各批次間質量可做到穩定一致。此培養基可用來檢測某種營養物或藥物對微生物代謝的影響。組織細胞培養液均屬合成培養基。合成培養基的成本較高,其價格相當于同類天然培養基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養基,只適用于自養菌的培養,如培養亞硝化細菌、氧化硫桿菌等的培養基。有些培養基大部分成分為已知化學結構的營養物質,其中的個別或少數成分為未明化學成分的必須營養物,成為半合成培養基,如百日咳菌苗生產用的水解酪素培養基。常見的培養基有LB培養基,YPD培養基,M9培養基和DMEM培養基等。

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在培養基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細菌生長,促進目的菌的繁殖,并使所生長的細菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養基稱為選擇性鑒別培養基。如SS瓊脂,在該培養基配方中含有乳糖(反應底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發酵乳糖產酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發酵乳糖,其菌落為無色。如細菌產生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達到鑒別的目的。培養基類型和配方可以根據需要進行定制,以滿足特定的實驗需求。Miller培養基

培養基中的各種成分會被微生物不同速率地利用,因此需要在適當的時間點更新培養基以維持細胞的生長狀態。七葉苷培養基

1951年厄爾開發了供動物細胞體外生長的人工合成培養基(MEM)。合成培養基的種類相當多。合成培養基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用的基礎合成培養基還必須加入一定量的天然培養基成分,以克服合成培養基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養產物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養基不加動物血清,在基礎培養基中加入細胞生長有效因子等。七葉苷培養基

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