含乙二醇基的多糖經過碘酸氧化,產生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,變黃則失效。糖原染色試劑盒。自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。天津哪家生產糖原染色試劑盒廠家批發價
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。在染色時,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。上海口碑好的糖原染色試劑盒單價較大增強了染色效果;性能穩定,特異性強;操作簡捷,*需1h左右。
醫院檢驗中心糖原染色操作規程:1.雪夫氏試劑:400m1 蒸餾水煮沸除去 C02,逐漸加堿性 品紅 2.08 溶解后,待冷卻至 60℃,加 1mm01 兒 HCl40ml, 再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳 1.5g, 放置半天后過濾。配好后液體為無色透明,保存于 4℃ 冰箱中。 2.過碘酸作用液:過碘酸 1g 溶于蒸餾水 100ml 中,或取 過碘酸鉀(1tI04)0。698 加蒸餾水 100ml,微加熱使溶 解,再加濃硝酸 0.3m1,置冰箱中保存。 3.固定液:95%乙醇 90ml 與甲醛 10m1 混勻。 4.20g/l 甲基綠:甲基綠 2g 溶于 100m1 蒸餾水。 [操作] _x000c_(1) 新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內 10 分鐘。 (2) 水洗數次后,對照片先用唾液消化 30 分鐘,也可在 同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對照,另一半做 測定。 (3) 水洗后,滴加過碘酸數滴于涂片上,作用 10 分鐘后, 再水洗數次。
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內24h加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。
糖原染色是病理學中常規的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基,使之變為二醛,醛不Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區別黏蛋白和糖原。過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染。湖南口碑好的糖原染色試劑盒銷售廠家
對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。天津哪家生產糖原染色試劑盒廠家批發價
PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞或Reed-Sternberg細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性或陰性反應。②幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者呈強陽性反應,后者呈弱陽性反應,且空泡中心為陰性反應。③幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉移的腺細胞,后者呈強陽性反應,陽性反應物質為紅色細顆粒狀或粗顆粒狀,有時呈紅色塊狀。白細胞系統:急性淋巴細胞白血病時白血病性原始淋巴細胞的陽性反應物質為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,底色不紅;急性粒細胞白血病時,白血病性原始粒細胞的陽性反應物質呈均勻分布的紅色細顆粒狀或呈均勻紅色;急性單核細胞白血病時,白血病性原始單核細胞的陽性反應物質呈紅色細顆粒狀,彌散分布,有時在胞漿的邊緣處顆粒較粗大。天津哪家生產糖原染色試劑盒廠家批發價
蘇州君欣生物科技有限公司擁有蘇州君欣生物科技有限公司的經營范圍包括原代細胞的定制以及相關產品的配套銷售與服務,干細胞染色體核型分析與鑒定、無血清細胞培養基以及無血清細胞凍存等系列產品的生產與銷售,動物疾病模型的構建以及藥物效果的驗證等領域。等多項業務,主營業務涵蓋原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養基,動物疾病模型。一批專業的技術團隊,是實現企業戰略目標的基礎,是企業持續發展的動力。蘇州君欣生物科技有限公司主營業務涵蓋原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養基,動物疾病模型,堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。一直以來公司堅持以客戶為中心、原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養基,動物疾病模型市場為導向,重信譽,保質量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。