外泌體相關miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節轉錄水平上的基因表達，目前非編碼RNA被普遍發現存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合，從而阻滯整個生物通路。因此，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環游離miRNA的表達，與75例健康者相比，發現了兩種高表達的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估，結果顯示，12個一些病癥相關的miRNA*在肺病患者中過度表達。Cazzoli等收集了30個血漿樣本，發現4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等，因此發表文章時易受質疑。外泌體提取試劑哪里買

外泌體在肺病治病中的作用：有研究發現，使用外泌體運載紫杉醇（PTX）可顯著提高病細胞對PTX的吸收，將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性，Exo-PTX能顯著壓制肺病的發展。Aqil等在進行裸鼠實驗時發現，加載至外泌體中的雷公藤紅素（Exo-CEL）比普通的CEL有更強的抗一些病癥功效，且在小鼠中未發現明顯全身性或系統性毒性，由此可以證明，外泌體制劑可以有效增強CEL功效并降低與劑量有關的毒性。到目前為止，外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制，有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關的潛在治病靶點的探索。已有的研究表明外泌體在肺病治病領域有著廣闊的前景，期待外泌體在肺病治病領域早日得到突破，造福更多的患者。正規外泌體提取試劑供應商通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。上海正規外泌體提取試劑廠家直銷直接把外泌體從尿液中沉降下來，無須分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。

外泌體與肺病預后：外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發現，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發現，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統分析了28位NSCLC患者體內的365種miRNA，其中let-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調，進一步研究發現，let-7f和miR-30e-3p水平可以區分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關。

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉8-10次使樣本與抗凝劑混勻，避免劇烈搖晃。混勻后，將試管固定垂直放置于離心分離器，在頂部記錄抽血的準確時間，因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內是比較穩定的，若時間過長將導致外泌體數量增加。血小板極易因抽血時的物理因素而并釋放出外泌體，其中包括接觸、壓力、切力。2、抽血時間。除了血液黏度，體內血液的各項指標在1天中變化很大。生理節律會對血小板的產生很大的影響。白細胞的募集和循環系統中促炎細胞和細胞會隨時間變化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會隨時間變化。目前尚無設計較好的實驗對證實不同時間血液中外泌體的變化，故應在相同的時間采集樣本。目前飲食是否會對EV產生影響尚未可知，但是由于脂蛋白可運載RNA且食物的攝取可以影響循環脂蛋白顆粒的類型、數量和作用，故抽血可在較后一次用餐后一段確定的時間進行。外泌體的提取、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法。

外泌體可通過流式、WB（檢測指標有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測，普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小，樣本含量低，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等。但到目前為止，仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性。外泌體是細胞間進行物質運輸和信息交流的重要工具，可以通過調節免疫功能促進一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉移。與細菌傳染，幫助細菌逃避免疫關系很大，并與心血管疾病，老年癡呆等疾病具有密切關系獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時。南京正規外泌體提取試劑價格

外泌體提純試劑盒的特色與優勢：無需耗時的超速離心，過濾或特殊注射器。外泌體提取試劑哪里買

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒，組分經過優化處理，適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時，可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進行Westernblot檢測，可以鑒定所提的外泌體。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量外泌體提取試劑哪里買