為了給醫療和科學領域提供 、值得信賴的產品及專業服務,數十年以來,除持續在營銷與服務上的改進外,力康一直不懈努力優化供應鏈管理和生產流程。我們擁有專業的質量控制體系及高度整合的生產模式,在客戶需求鑒別的基礎上,嚴格執行規范的作業流程,準確地使用作業工具、規范作業方法和生產記錄,并按照作業標準把控各個生產和檢驗環節,實時進行質量測量和監督檢查,控制產品質量,使之符合質量技術要求。無論是采購、生產、新品開發、成品抽檢還是改進產品,我們認真對待每個環節的檢驗,關注細節,了解產品質量現狀,積極應對測試中發現的問題,采取措施來滿足客戶的需求,“不允許不合格品件進入下一道工序”是我們的一貫宗旨。PCR實驗室在儀器設備等硬件上要滿足開展臨床檢驗的條件,包括生物安全柜和PCR儀。國產梯度PCR儀廠家直銷價
目前,采用熒光定量PCR檢測技術可以對淋球菌、沙眼衣原體、解脲支原體、人類瘤病毒、單純皰疹病毒、人類免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、結核分枝桿菌、EB病毒和巨細胞病毒等病原體進行定量測定。與傳統的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優點。如:結核菌基因診斷的意義主要表現在:a.區分TB與其它分枝桿菌;b.檢測TB耐藥基因;c.提高TB的陽性檢出率。⑵產前診斷到目前為止,人們對遺傳性物質改變引起的遺傳性疾病還無法,只能通過產前監測,減少病嬰出生,以防止各類遺傳性疾病的發生,如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生,從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,用實時熒光定量PCR檢測其Y性別決定區基因是一種無創傷性的方法,易為孕婦所接受。⑶藥物療效考核對乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)定量分析顯示:病毒量與某些藥物的療效關系。HCV高水平表達,干擾素作用不敏感,而HCV低滴度,干擾素作用敏感;在拉米夫定過程中,HBV-DNA的血清含量曾有下降,隨后若再度上升或超出以前水平,則提示病毒發生變異。如PCR技術在HBV檢測中的應用及意義:a.了解乙肝病毒在體內存在的數量。b.是否復制。c.是否傳染,傳染性有多強。d.是否有必要服藥。 國產梯度PCR儀批發價PCR儀也叫基因擴增儀。
PCR基因擴增法在遺傳性疾病產前診斷中的應用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質。苯西酮尿癥(PKU)是一種常染色體隱性遺傳病,患者因苯丙酸羥化酶轉化為酷氨酸,使苯氨酸及其代謝物在體內大量蓄積,出現腦組損傷及不可逆性智力發育障礙。PKU患者出生時正常,新生兒一經確診為PKU停止母乳喂養采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年,可使患者智力水平發展維持正常。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴,一般家庭難以承受,因此,施行產前診斷,防止患兒出生是比較好的選擇。PAH只在肝細胞中表達,不能用血細胞,成纖維細胞、羊水、絨毛細胞進行酶活性分析,只能進行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失,而是以點突變為主要表現形式,而且其突變位點很多。必須使用PCR擴增結合,ASO,SSCP或使用擴增片段長度多態性分析(AmpFLA)進行檢測,這些技術都較復雜,檢驗人員須經專業培訓。
選擇該物種使用頻率高的密碼子,以降低引物的簡并性。③應努力避免3’末端的簡并,對于大多數氨基酸殘基來說,意味著引物3’末端不要位于密碼子的第三位。④在一些多義位置使用脫氧次黃嘌呤(dI)代替簡并堿基。4.測序引物設計當然,測序引物的設計一般都由測序公司來完成,如果需要自己設計的話;那么除了按照上面所提到的引物設計通用標準外,還需要注意兩點:①測序引物的特異性的標準掌握應該更嚴格一些,也就是說設計時更優先考慮特異性。因為在測序反應中,如果引物與模板在非預期位置退火并引發鏈延伸,會對結果對來很大的干擾甚至造成結果無法識讀。②測序引物的Tm值適當高一些。現在大部分測序反應均選用耐熱的測序級DNA聚合酶來催化,并采用PCR的熱循環程序。選用的測序引物的Tm值稍高一些,有助于使反應順利跨過待測模板的二級結構區,也有助于降低非特異反應。5.探針的設計探針的設計,根據不同的用途各有其設計特點,這里只是就通用的原則進行討論:①探針的長短一般在20-50核苷酸之間,過長合成成本高,且易出現聚合酶合成錯誤,雜交時間長。太短則特異性下降。②注意G和C的含量努力控制在40-60%,同時一種堿基連續重復不超過4個,以免非特異性雜交產生。 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。
熒光定量PCR儀因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的現今,難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算,更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對各種不同性能的產品,您又該如何選擇呢?首先建議大家走出認識熒光定量PCR的兩個誤區:誤區一:儀器通道越多越好隨著PCR技術的成熟運用,多重擴增越來越熱鬧,熒光定量PCR儀也不能幸免。在使用有些廠家5通道的熒光定量儀時,為了確保實驗結果的精確性和準確性都要在實驗中使用ROX(一種熒光染料)或Referencedye,這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。這樣以來,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。考慮多重熒光定量PCR的通道數的時候也應該從實驗室實際情況出發,多重PCR并非人人適用、人人可用,因為它使實驗復雜化了。誤區二:real-timePCR儀無需梯度功能對于使用染料法的定量PCR反應,雖然有各種各樣的PCR引物設計軟件或者經驗公式計算熔解溫度(Tm值),但運用的公式不同、引物序列不同。PCR技術起初的臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。國產實驗室PCR儀規格有哪些
PCR擴增儀通常由熱蓋部件、熱循環部件、傳動部件、控制部件和電源部件等部分組成。國產梯度PCR儀廠家直銷價
PCR儀的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:1、模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;2、模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;3、引物的延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈重復循環變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍(Plateau)。到達平臺期所需循環次數取決于樣品中模板的拷貝。在此同時認識到蛋白質是接受RNA的遺傳信息而合成的。50年代Zamecnik等在形態學和分離的亞細胞組分實驗中已發現微粒體(microsome)是細胞內蛋白質合成的部位。 國產梯度PCR儀廠家直銷價
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