PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。PCR儀實際就是一個溫控設備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制。PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應核酸擴增儀,是利用PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶鏈反應)技術對特定DNA擴增的一種儀器設備,被運用于醫學、生物學實驗室中,例如用于判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復制以及親子鑒定等。 PCR一般指聚合酶鏈式反應。上海梯度PCR儀批發價格
力康GM05智能梯度基因擴增儀(控溫儀)性能特點:高清晰超大7寸液晶顯示屏-可選鍍金/鍍銀模塊,提高熱傳導效率,使實驗更高效;方便靈活的模塊更換裝置,輕松更換模塊;熱蓋旋鈕無級可調,適用各型號試管;樣品座工作區域全密閉設計,可確保低溫保存干燥清潔;可任意角度定位熱蓋;具備斷電記憶功能;環境溫度自動讀取,自動修正溫控誤差;支持用戶實驗預約設定,鬧鐘提醒功能;支持程序搜索功能,支持常用程序優先選擇功能;支持多重嵌套循環;支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR設定;可外接移動硬盤和鼠標,支持觸摸和鼠標操作;可實現遠程故障判斷;具有TM值計算功能,可更好地幫助用戶進行引物設計;可單獨配備PC機操作軟件,PC機與主機可分別各自控制,并實現一機多控。上海基因擴增PCR儀近期價格PCR在醫學檢驗學中的應用領域就是對傳染性疾病的診斷。
一對引物的Tm值相差盡量不超過2~3攝氏度,同時引物和產物的Tm值也不要相差太大,20攝氏度范圍內較好。④引物的額外序列與退火溫度若有額外的序列信息要加到引物中,例如T7RNA聚合酶結合位點、限制酶切位點或者GC發夾結構可以使用加長的引物。一般說來,引物5’端添加無關序列不會影響引物特異序列的退火。有時候,引物中添加了大量與模板不配對的堿基,可以在較低退火溫度的條件下進行4到5個擴增循環;然后在假定引物5’端序列已經加入到模板中,計算得出的退火溫度下進行其余的循環。在引物上添加限制酶位點時一個重要的考慮是大多數限制酶的有效切割要求在它們的識別序列的5’端有2至3個非特異的額外堿基,這樣就會增加引物的非模板特異序列的長度。長引物序列的另一個缺點是影響溶解溫度的精確計算,而這對于確定PCR反應時的退火溫度又是必須的。對于低于20個堿基的引物,Tm值可以根據Tm=4(G+C)+2(A+T)計算。而對于較長的引物,Tm值需要考慮動力學參數、從“近鄰位”的計算方式得到,現有的PCR引物設計軟件大多數都采用這種方式。⑤引物的3’末端核苷酸組成引物3’末端和模板的堿基完全配對對于獲得好的結果是非常重要的。
完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、離心機、加樣器等。實驗室是科學的搖籃,是科學研究的基地,科技發展的源泉,對科技發展起著非常重要的作用。PCR實驗室規范的操作:(1)臨床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓,經培訓合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作;(2)在實驗操作過程中,操作者必須戴手套,并經常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施;(3)清潔工作及時、正確。實驗工作結束后,必須立即對本區進行清潔。除常規的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。嚴格規范管理要求(1)嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設置的通道和進出整個實驗區的門;(2)在各個實驗區域使用帶有明顯區別標志的工作服(如不同顏色),當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域;(3)盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。(4)擴增產物分析區是較主要的擴增產物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉。PCR儀被大量運用于醫學、生物學實驗室中。
PCR實驗室又叫基因擴增實驗,是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA的片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握生物體內的病毒含量,其精確度高達納米級別。PCR實驗室運行的條件1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室實時熒光定量PCR技術于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出,由于該技術不實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用。2、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件,構成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統。3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證;4、檢測人員必須通過國家臨檢中心業務培訓并取得合格證書。PCR實驗室內工作人員必須參加由國家衛生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓班,并持證上崗。PCR實驗室通過驗收,實驗室至少必須應有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理制度、建立標準化操作程序(SOP)、建立系列質量管理文件等。確保實驗室日常運行符合國家衛生部的要求,確保檢測結果準確、確保實驗室衛生安全。熒光定量PCR是近年發展起來的實時定量檢測特定核酸技術,是核酸探針,熒光共振能量傳遞和PCR技術的有機結合.上海梯度PCR儀批發價格
PCR擴增儀通常由熱蓋部件、熱循環部件、傳動部件、控制部件和電源部件等部分組成。上海梯度PCR儀批發價格
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統得出量化的實時結果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當只用一種熒光探針標記的時候,選用單通道,有多熒光標記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同目的基因片段的量。主要用于醫學臨床檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等機構。根據DNA擴增時升溫介質的不同可以將PCR儀分為:變溫鋁塊式PCR儀、水浴式PCR儀和變溫式流式PCR儀。1.變溫鋁塊式PCR儀熱源用電阻絲、導電熱膜、熱泵式珀爾帖半導體元件制作,讓帶有凹孔的鋁塊升溫,用自來水、制冷壓縮機或半導體降溫。優點:溫度傳導快,各管的擴增一致性好;反應管規格一致時無須外涂石蠟油;可用微電腦調節溫度轉換。 上海梯度PCR儀批發價格
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