PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DN段，可看作生物體外的特殊DNA復制。其特點是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學研究和實驗的常規方法，PCR實驗室廣泛應用于生物學各個領域，PCR實驗室主要實驗項目：檢測，乙型肝炎，禽疫病，基因的檢測和診斷，DNA指紋，個體識別，親子鑒定及法醫物證等等。pcr實驗室設計建設中容易出現的問題：1、PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區空氣壓力逐漸遞減方式進行，防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前的區域。需要嚴格的通風設計，若通風設計不合理，會使風速流向混亂，甚至危害人們健康。2、人流路徑與物流路徑設計不合理進入實驗室區域工作人員應該按照以下路徑：公共清潔區——更衣間（更換潔凈服）——緩沖間——污染實驗區工作人員退出實驗室的路徑為：污染試驗區——緩沖間——淋浴間。 熒光定量PCR儀是以熒光染料或熒光標記探針偵測每次聚合酶鏈鎖反應（PCR）循環后產物總量。上海核酸定量PCR儀廠家供應

    在凈化車間內工作的人員應穿著符合要求的工作服。工作服的選材、式樣及穿戴方式應與生產操作和空氣潔凈度級別要求相適應，并不得混用。潔凈工作服的質地應光滑、不產生靜電、不脫落纖維和顆粒性物質。無菌工作服必須包蓋全部毛發、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。不同空氣潔凈度級別使用的工作服應當分別清洗、整理，必要時消毒或滅菌。工作服洗滌、滅菌時不應帶入附加的顆粒物質。工作服應制定清洗周期。進入各個區域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開時，不得將工作服帶出。實驗室應建立、執行人員進出潔凈區的清潔程序和管理制度，人員清潔程序合理。實驗室需要至少配備兩名專業實驗員，能夠處理樣品、提取核酸及核酸擴增，熟練掌握超凈工作臺、生物安全柜、自動提取儀、實時熒光定量PCR的使用，加強生物安全方面的培訓，避免實驗室污染。上海實時定量PCR儀廠家供應根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類.

    1．一般性原則(1)長度：一般引物互補區的長度為16-25bp，引物互補區的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒有必要大于70，一般也不要低于50(2)G十c含量：好在45％一55％之間，但有時受模板限制，無法理想化。但在有幾種選擇時，可以把G十c含量接近50%作為參數之一(3)堿基分布的隨機性：應避免連續出現4個以上的單一堿基。尤其是不應在其3’端出現超過3個的連續G或C，否則會使引物在G十C富集序列區錯誤引發。(4)引物自身：不能含有很長的牢固的自身互補序列，尤其是引物3‘端回折形成的發夾不要一般超過3堿基，否則會影響引物與模板的結合(5)引物之間：兩個引物之間不應有很長的牢固的互補或同源堿基，尤應避免3’端的互補重疊。2.具體原則①引物長度；特異性一般通過引物長度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設置在近于引物Tm值（引物/模板雙鏈體的解鏈溫度）幾度的范圍內，18到24個堿基的寡核苷酸鏈是有很好的序列特異性的。引物越長，擴增退火時被引發的模板越少。為優化PCR反應，使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物，可獲得好的效率和特異性。總的來說，好在特異性允許的范圍內尋求安全性。每增加一個核苷酸，引物特異性提高4倍；這樣，大多數應用的短引物長度為18個核苷酸。

    1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分離出tRNA并對它們在合成蛋白質中轉運氨基酸的功能提出了假設；1961年Brenner及Gross等觀察了在蛋白質合成過程中mRNA與核糖體的結合；1965年Holley測出了酵母丙氨酸tRNA的一級結構；特別是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等幾組科學家的共同努力破譯了RNA上編碼合成蛋白質的遺傳密碼，隨后研究表明這套遺傳密碼在生物界具有通用性，從而認識了蛋白質翻譯合成的基本過程。從分子生物學的發展過程，可以看到在近半個世紀中它是生命科學范圍發展*為迅速的一個前沿領域，推動著整個生命科學的發展。至今分子生物學仍在迅速發展中，新成果、新技術不斷涌現，但分子生物學的歷史還短，積累的資料還不夠。例如：在地球上千姿萬態的生物攜帶龐大的生命信息，迄今人類所了解的只是極少的一部分，還未認識核酸、蛋白質組成生命的許多基本規律；又如即使到2005年我們已經獲得人類基因組DNA3×109bp的全序定了人的5-10萬個基因的一級結構，但是要徹底搞清楚這些基因產物的功能、調控、基因間的相互關系和協調，要理解80%以上不為蛋白質編碼的序列的作用等等，都還要經歷漫長的研究道路。可以說分子生物學的發展前景光輝燦爛。 PCR技術是支撐現代分子生物學發展的一塊重要基石。

普通PCR儀：一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統PCR儀，也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應用于科學研究、教學、醫學臨床、檢驗檢疫等機構。

梯度PCR儀：一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件（溫度梯度，通常有12種溫度梯度）的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴增的不同DN段，其適退火溫度是不同的，通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增，從而一次性PCR擴增，就可以篩選出表達量高的適退火溫度，進行有效的擴增。用于研究未知DNA退火溫度的擴增，這樣節約成本的同時也節約了時間。梯度PCR儀在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。主要應用于科研、教學機構。梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增，這樣既節約時間，也節約成本。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。梯度PCR儀多應用于科研、教學機構,檢驗、檢疫等。 PCR的三個反應（變性-退火-延伸）0步驟反復進行，使DNA擴增量呈指數上升。力康國產品牌PCR儀批發價格

PCR技術起初的臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。上海核酸定量PCR儀廠家供應

    它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。（2）此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實時地監測反應全過程。這兩個發現的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發展導致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的運用。PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數方式增加的，隨著反應循環數的增加，終PCR反應不再以指數方式生成模板，從而進入平臺期。在傳統的PCR中，常用凝膠電泳分離并用熒光染色來檢測PCR反應的終擴增產物，因此用此終點法對PCR產物定量存在不可靠之處。在real-timeQ-PCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的監測和連續地分析擴增相關的熒光信號，隨著反應時間的進行，監測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲線。在PCR反應早期，產生熒光的水平不能與背景明顯地區別，而后熒光的產生進入指數期、線性期和終的平臺期，因此可以在PCR反應處于指數期的某一點上來檢測PCR產物的量，并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對所檢測樣本進行比較，在real-timeQ-PCR反應的指數期，首先需設定一定熒光信號的域值，一般這個域值（threshold）是以PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號（baseline）。 上海核酸定量PCR儀廠家供應

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