才能滿足新細胞合成、細胞代謝等生化反應所需要的物質和能量。細胞培養基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養物質等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。水是細胞的主要成份,也是細胞賴以生存的主要環境。細胞培養液中90%以上的成份是水。細胞對水的品質非常敏感,水的品質將直接影響細胞培養的效果。而水中通常含有重金屬、氯、磷、有機物、熱原等污染物,細胞培養用水須經過純化,品質應符合***典注射用水標準或者超純水的標準。能源和碳源是用于維持細胞生命和支持細胞生長,主要包括糖、糖酵解的產物和谷氨酰胺,其他氨基酸是次要的能源和碳源物質。細胞能夠利用的糖類主...
**早開發的基礎培養基(minimalessentialmedium,MEM),其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹,其特性及應用的范圍見表1-2。表1-2常用合成培養基的特性及應用的范圍培養基名稱特性及應用范圍199細胞培養基添加適量的血清后,可***用于多種細胞培養,并用于**學、*苗生產等。MEM細胞培養基MEM(MinimalEssentialMedium)培養基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平...
無血清培養基,一般是在合成培養基的基礎上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉*細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子及***:針對不同細胞添加不同的生長因子。***也...
維持15-20分鐘,可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**,如普通培養基、生理鹽水、手術敷料等。(二)下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗證方法高壓蒸氣**器使物品**后達到無菌要求,這是**實驗中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實驗成敗的**基礎**關鍵的首要步驟。除少數培養基只需加熱溶解,不需高壓**外,大部分培養基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養基**不徹底,直接關系到對**的無菌試驗結果。因此必須認真對高壓**器進行**效果的驗證。為此我們提供了進行**效果驗證的一個簡易可行的方法。1.試驗材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜...
從而使培養基的預熱、加熱**及冷卻過程可在同一設備內完成。該流程的加熱和冷卻時間比噴射加熱連續**流程要長些,但由于在培養基的預熱過程同時也起到了**后培養基的冷卻,因而節約了蒸汽和冷卻水的用量。(2)蒸汽直接噴射型的連續**系統流程中采用了蒸汽噴射器,它使培養液與高溫蒸汽直接接觸,從而在短時間內可將培養液急速升溫至預定的**溫度然后在該溫度下維持一段時間**,**后的培養基通過一膨脹閥進入真空冷卻器急速冷卻,從圖中可以看出,由于該流程中培養基受熱時間短,營養物質的損失也就不很嚴重,同時該流程保證了培養基物料**先出,避免了過熱或**不徹底等現象。(3)由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的...
培養基制備培養基使用說明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見過一些實驗室,不經加熱直接高壓**,也有的實驗室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對檢測結果有沒有影響?品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養基制備培養基制備后應保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調PH值C、過濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求助】培養基制備請問牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號:12...
1/2cs生長培養基的培養結果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養基上的存活率為100%,培養16d的幼苗,表現為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發達、平均根數為8個。如圖4所示。對比培養例4:將1/2cs基本培養基替換為1/2ms基本培養基,其余完全同培養實例4,1/2ms基本培養基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養基的培養結果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養基上的存活率為100%,培養16d的幼苗,表現為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發達、平均根數為6個。如圖4所示。培養實例4和對比培養例4的培養結果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養基和...
三)、試驗結果:初代培養:使用本發明的消毒方法,消毒成功率能達到80%,誘導培養基萌芽率能達到90%,可以成功建立無菌再生體系。繼代培養:使用本發明的增殖培養基,繡球組培苗增殖倍率能夠達到8~10倍,組培苗高度一致,生長健壯。生根培養:使用本發明的生根培養基,繡球組培苗生根率能夠達到95%,根系發達,健壯,可以成功用于移栽大棚。本發明所指ms培養基是murashige和skoog研制的培養基,其成分配方表見表1。1/2ms培養基是指大量元素含量為ms培養基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培養基成分表本發明涉及的植物生長調節劑有:6-ba—6-芐氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚...
K+主要分布在細胞內液,細胞內K+對于***某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細胞外液中的作用是將**內部細胞之間相互粘著,在細胞內參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。在懸浮培養時,為了減少細胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構成細胞間質的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質代謝和生理功能調控有重要作用。其他成分:肽、核苷、嘌呤等。可幫助細胞的克隆化培養及維持某些特殊細胞系的生長。分類低血清細胞培養基概述營養豐富的培養基是維持細胞活性及高密度生長的基礎,營養缺乏容易引起細胞凋亡,新生...
促使植物材料快速生長、芽體健壯。本發明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s4中,將s3中的無菌外植體接入增殖培養基中后的培養環境為在光照強度1500lux條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養8~12周。通過采用上述技術方案,在該培養條件下能夠有效避免增殖培養階段植物材料出現應激反應,植物材料能夠快速適應增殖培養基,促使植物材料快速生長、芽體健壯。本發明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s4中,每隔8~12周轉接入新的增殖培養基。通過采用上述技術方案,經過8~12周后,增殖培養基的效果將會減弱,植物材料也會污染增殖培養基,需要及時更換。本發明在一...
cs液體培養基和1/2cs液體培養基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩定,在未調ph的情況下,可直接用于多種植物培養。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例,觀察在未調ph和將ph調至:a、培養基制作方法:隨機選取超純水,測得其ph為,用于配制8種不同的液體培養基。第一種:1/2ms未調ph液體培養基,其為取1/2ms基本培養基置于ph為;第二種:1/2cs未調ph液體培養基,其為取1/2cs基本培養基置于ph為;第三種:ms未調ph液體培養基,其為取ms基本培養基置于ph為;第四種:cs未調ph液體培養基,其為取cs基本培養基置于ph為;第五種:1/,其為取1/...
水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物,含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡鹽溶液溶解)與合成培養基(如MEM細胞培養基)以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機物等,這些物質對促進細胞生長或**生長活性是達到生理平衡的。此外,血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。...
按中華******典2005年版二部附錄ⅧL干燥失重測定法進行。滲透壓溶劑通過半透膜由低濃度向高濃度溶液擴散的現象稱為滲透,阻止滲透所需施加的壓力,稱為滲透壓。細胞必須生活在等滲環境中,動物細胞借助K+、Na+維持滲透平衡。大多數細胞對滲透壓有一定的耐受性。但是培養液滲透壓過高容易使細胞脫水萎縮,培養液滲透壓過低容易使細胞膨脹破裂,因此要控制培養基的滲透壓范圍。按中華******典2005年版二部附錄ⅨG滲透壓摩爾濃度測定法進行。**內*****內***是許多病原性**所產生的***。它的特殊性在于不是**或**的代謝產物,而是**死亡或解體后才釋放出來的一種具有生物活性的物質。培養基...
附圖說明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養基上,哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養的對比效果圖,a:無菌苗在培養基中生長情況;b:無菌苗蓮座葉及根系發育;c:萌發率;d主根長度;a和b中bar=;圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養基上,蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養的對比效果圖,a:無菌植株在培養基中生長情況;b:無菌植株地上部分及根系發育;c:無菌植株花***發育(左)和花粉的亞歷山大染色(右);d:主根長度;e:株高;f:蓮座葉長度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養基上,油菜無菌苗培養的對比...
所以做過強檢的**器還必須進行**效果的驗證。一些單位常常忽略了這個重要的問題。國內市售的手提**器,往往儀器指針達到所需的溫度,但**物品的實際溫度卻未達到要求。導致**物品不徹底,影響實驗結果。培養基**不徹底,影響培養基的使用及結果判斷。因此高壓蒸氣**器無菌效果的驗證是一個必須引起重視的問題。(三)**時的注意事項使用高壓蒸氣**器時,首先應注意在開放蒸氣的同時,排除**器內的冷空氣。必須將器內冷空氣全部排除后,才可關閉排氣孔。假如**器內仍存留有部分空氣時,剛壓力表上雖已達到了某一壓力值,但器內之溫度仍未達到相應之度數。存留的空氣越多,剛二者相差也越大。差也越大,器內溫度不足...
按每個2品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【原創】實驗室培養基制備質量保證通則我正在學習這個標準,對實驗室認可很重要,有興趣的一起學習,同時希望得到高人指點品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【分享】微生物常識---第二講培養基制備技術一、玻璃器皿的清洗在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過**等準備就緒后,才能使用。品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【資料】培養基...
若應用于植物培養中的液體培養基制作,可不用調節ph,用超純水(ph為)充分溶解后定容,便可直接應用于大多數植物水培。培養實例1:哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(1)種子保存及消毒方法:a、擬南芥種子保存方法:哥倫比亞(col,columbia)型擬南芥種子成熟后,收取種子于,加入3-8顆變色**干燥劑,用封口膜密封后置于4℃長期保存;b、擬南芥種子**消毒方法:取出經低溫干燥保存的種子,于無菌環境下,將適量種子置于無菌,加入適量體積的無菌水,將離心管顛倒幾次后用低速離心機離心10s,小心倒掉上清,重復3次;加入75%酒精,將離心管顛倒幾次后用低速離心機離心10s,小心倒掉上清;用無菌水清洗...
從而使培養基的預熱、加熱**及冷卻過程可在同一設備內完成。該流程的加熱和冷卻時間比噴射加熱連續**流程要長些,但由于在培養基的預熱過程同時也起到了**后培養基的冷卻,因而節約了蒸汽和冷卻水的用量。(2)蒸汽直接噴射型的連續**系統流程中采用了蒸汽噴射器,它使培養液與高溫蒸汽直接接觸,從而在短時間內可將培養液急速升溫至預定的**溫度然后在該溫度下維持一段時間**,**后的培養基通過一膨脹閥進入真空冷卻器急速冷卻,從圖中可以看出,由于該流程中培養基受熱時間短,營養物質的損失也就不很嚴重,同時該流程保證了培養基物料**先出,避免了過熱或**不徹底等現象。(3)由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的...
體外動物細胞培養時需要大量谷氨酰胺,利用量常超過其他必須氨基酸利用量的總和。維生素是維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調節及控制作用。維生素可分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素主要包括泛酸、維生素B12、葉酸、煙酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黃素、維生素C、膽堿、肌醇等;脂溶性維生素主要包括維生素A、D、E、K等;有的培養液中還直接采用ATP和輔酶A;大部分培養基中還有生物素。許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。比如,泛酸可以在細胞內轉變成酰基載體蛋白和輔酶(如輔酶A),參與糖類、脂類和蛋白質代謝中的催化反應;維生素B12則在細胞內...
發酵培養基為:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;發酵工藝同實施例1,100l發酵罐中含有70l發酵培養基。設置cecl3的添加濃度為0,,如圖1-2所示,隨著cecl3添加量的增加,菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升,當添加量為10mg/l時,菌體濃度和谷氨酸含量達到峰值,然后出現下降趨勢,但是整個過程中,糖酸轉化率沒有明顯改變(附圖未顯示);說明cecl3稀土鹽能夠促進菌株增殖,提高谷氨酸相關合成酶的活...
一)、實驗室種子培養基**方法1、高壓蒸汽**鍋、手提式**鍋。容量小。2、立式或臥式**鍋。容量較大,一般能裝幾十瓶或幾百瓶。3、**柜。要和蒸汽鍋爐配套,用于大量種瓶培養基的**,一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。(二)、培養基的分批**1、定義:將配制好的培養基輸入發酵罐中,用蒸汽加熱,使培養基和設備同時**的一種**方式,又稱實罐**。2、**過程過程包括升溫、保溫和冷卻等三個階段,各階段對**的貢獻:20%、75%、5%。培養基的升溫可由兩種方式實現:間接加熱,在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱;直接加熱,在培養基中直接通入熱蒸汽加熱。**過程中加熱和保溫階段的**作用是主要的,而冷卻階段...
但酚紅在無血清細胞培養基中可能帶來胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長。碳酸氫鈉在細胞培養基中主要是作為緩沖系統,此外還具有調節滲透壓的作用。通常產品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標準、安全量,是在科學的基礎上根據實踐經驗所得。但是由于不同的細胞系(株)不同,同一株細胞適應環境也可能不同(細胞耐受性不同等),且存在的地域性水質差異等,在實際生產過程中也可稍作改動,但使用者需做相應的檢測(理化及細胞生產試驗等)。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH~,在高濃度時對一些細胞可能**。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10...
mgso4·7h2o20-200mg/l,2-羥基乙胺10-50mg/l,cecl31-20mg/l,mnso4·h2o1-10mg/l,feso4·7h2o1-10mg/l,vb15-50mg/l,生物素1-10μg/l;將各原料攪拌均勻后,調節ph為6-7,121℃**,自然冷卻,制得發酵培養基a。更推薦地,所述發酵培養基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg...
已發現當培養基中的血清濃度減少時,這些成分都是必需的。既使在使用血清的情況下,這些成分也可幫助細胞的克隆化培養及維持某些特殊細胞系的生長。***和生長因子在大多數常規培養基的配方中都沒有注明,但在無血清培養基中通常要加入它們,用其來代替血清中的***能增加多種不同類型細胞的貼瓶率;生長因子包括FGF家族、EGF、PDGF、IGF-1和IGF-2及白介素等,生長因子和細胞因子有著***的特異性,一般與***或其它物質起相互協同或加成作用。另一種常見的添加物就是血清替代物,目前已有許多可完全或部分替代傳統培養液中血清成分的商業產品,其穩定性較好,但批次間仍有差別,產品的成分也不很確定。干粉...
培養實例2和對比培養例2的培養結果比較:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養基和1/2ms生長培養基上的萌發率均為100%;在相同條件下培養28d時,與1/2ms生長培養基相比,1/2cs生長培養基中的幼苗長勢更佳,在平均株高、蓮座葉大小、根長、花朵數量等方面均優于1/2ms生長培養基;并且,采用上述培養方法,不論是1/2cs生長培養基還是1/2ms生長培養基,均能獲得形態完整的花粉,且花粉活力高達%,其特點在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養對象,且選擇了高度適中的培養盒進行培養,克服了傳統培養方法無法獲得擬南芥整個生育期無菌苗的缺點,所獲無菌花***可直接用于花*離體培養等研究內...
NalgenePET/PETG方形培養基瓶NalgeneSquarePET和PETG培養基瓶是當今制*,診斷和生物技術市場中理想的培養基、血清、緩沖液、試劑儲存和運輸容器。這些耐用、輕質且防碎的聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)和厚壁抗破裂乙二醇改性(PETG)瓶兼容高密度聚乙烯(HDPE)密封蓋,具有三種兼容的密封蓋類型;標準螺紋密封蓋,防盜密封蓋和帶隔膜的密封蓋。獨特的Nalgene瓶和密封蓋設計無需襯墊或墊圈即可提供可可靠的防漏性能,并提供有效的氧氣和二氧化碳屏障,以維持試劑的適當pH值。這些包裝瓶可以從科研擴展到生產,同時提供實驗室使用的包裝瓶,以及手動和自動化灌裝線。Nalgen...
c、結果為:在用未調ph液體培養基進行培養時,整體長勢從優至弱分別為1/2cs未調ph液體培養基、cs未調ph液體培養基、1/2ms未調ph液體培養基、ms未調ph液體培養基;在用ph調至,整體長勢從優至弱分別為1/、、1/、;不論是否調ph至,cs液體培養基培養的馬鈴薯幼苗長勢均優于ms液體培養基;不論是否調ph至,1/2cs液體培養基培養的馬鈴薯幼苗長勢均優于1/2ms液體培養基。如圖9和圖10所示。說明,1/2cs液體培養基和cs液體培養基應用于植物水培時,不論是否調節ph至,均能獲得很好的培養效果,克服了傳統液體培養基必須調節ph后才適用于植物水培的缺點。**后說明的是,以上實...
K+主要分布在細胞內液,細胞內K+對于***某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細胞外液中的作用是將**內部細胞之間相互粘著,在細胞內參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。在懸浮培養時,為了減少細胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構成細胞間質的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質代謝和生理功能調控有重要作用。其他成分:肽、核苷、嘌呤等。可幫助細胞的克隆化培養及維持某些特殊細胞系的生長。分類低血清細胞培養基概述營養豐富的培養基是維持細胞活性及高密度生長的基礎,營養缺乏容易引起細胞凋亡,新生...
本氏***葉片及根愈傷**誘導的對比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導率;a和c中bar=;圖7是cs和ms兩種培養基上,水稻成熟胚愈傷**誘導的對比效果圖,a:水稻成熟胚愈傷**;b:水稻成熟胚愈傷**誘導率;a中bar=;圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養基ph值穩定性比較效果圖;圖9是在未調ph和將ph調至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養基中馬鈴薯幼苗的生長狀況的比較效果圖,a:不同液體培養基培養前的無菌苗生長情況;b1、c1和d1:1/2ms未調ph液體培養基培養效果;b2、...
培養基制備培養基使用說明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見過一些實驗室,不經加熱直接高壓**,也有的實驗室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對檢測結果有沒有影響?品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養基制備培養基制備后應保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調PH值C、過濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求助】培養基制備請問牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號:12...