核細胞、關節軟骨細胞、間充質干細胞（MSCs）：選擇兩種合成轉染試劑（陽離子脂質商業試劑LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亞胺（PEI））以及兩種天然衍生轉染試劑（多糖殼聚糖（98%脫乙酰化）和透明質酸（20%酰胺化）），用于將siRNA遞送到包括髓核細胞、關節軟骨細胞和間充質干細胞在內的原代間充質細胞中。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（***DH）作為內源性模型基因，在轉染后第3天和第6天評估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外，還評估了細胞毒性、DNA含量變化和細胞分化潛能等非特異性影響。在四種轉染試劑中，基于商業脂質體的試劑在20nMsiRNA時是**有效的siRNA遞送試劑，其次是殼聚糖。使用陽離子脂質體、殼聚糖和PEI轉染顯示出不同程度的活力和DNA含量下降，這取決于所評估的siRNA劑量和細胞類型，但與***DH敲低無關。一些對DNA含量的影響并不伴隨著活力的相應變化。然而，細胞周期抑制或進展的標記基因（如p21和PCNA）的表達變化不能解釋DNA含量的變化。有趣的是，發現了***DH活性的非特異性上調，這***于軟骨細胞15。肝*細胞HepG2和：比較兩種人類細胞模型中兩種轉染劑，即基于脂質體的Lipofectamine?RNAiMAX和基于聚合物的GenMute?。 由于CRISPR/Cas的發現，基因組編輯領域經歷了一場變革。內蒙古陽離子轉染試劑

RNA轉染試劑是一類能夠將RNA分子導入細胞內的物質，其作用原理主要涉及以下幾個方面。利用電荷相互作用：許多RNA轉染試劑是陽離子性的，它們可以與帶負電荷的RNA分子通過靜電相互作用結合形成復合物。例如，魚精蛋白是一種天然陽離子肽混合物，由于相反電荷驅動的耦合作用，被用于細胞內核酸的遞送8。魚精蛋白不僅可以保護RNA免受生物系統中的降解，還能增強其對細胞的穿透能力。陽離子脂質體也是常見的轉染試劑之一。以LipofectamineTM2000為例，它可以介導攜帶綠色熒光蛋白基因的真核表達載體轉染至雞成骨細胞9。陽離子脂質體通過其陽離子頭部與RNA的負電荷相互作用，形成脂質體-RNA復合物，然后通過與細胞膜的融合或內吞作用將RNA導入細胞內。內吞作用途徑：一些RNA轉染試劑通過內吞作用進入細胞。如合成的8-mer兩親性反式多聚2'-O-甲基尿苷硫代磷酸三酯RNA元件（2'-OMeUtaPS），它能介導將不帶電荷的聚A尾磷酸二酰胺基嗎啉代序列（PMO）高效遞送至HeLapLuc705細胞或肌管肌肉細胞。已確定大胞飲作用是HeLapLuc705細胞中使用的主要內吞途徑。河北合肥轉染試劑deae-葡聚糖是一種化學修飾的葡聚糖類似物。

二、影響因素的差異細胞接種密度：不同類型的細胞在比較好轉染效率下的細胞接種密度不同。例如，宮頸*細胞Hela和Siha的比較好接種密度為每24孔板的每孔1.5×10?個細胞1，而研究中Caco-2細胞的比較好接種密度為2×10?9。DNA用量：各種細胞所需的DNA用量也存在差異。如PC12細胞轉染的比較好DNA用量為2μg3，而Caco-2細胞轉染時比較好DNA用量為4μg9。脂質體與DNA的比例：不同細胞類型對應的比較好脂質體與DNA的比例不同。Hela細胞中miRNA與脂質體比例為1:0.5，Siha細胞中為1:0.71；Caco-2細胞轉染時比較好脂質體與DNA比例為2.5:19。復合物形成時間和孵育時間：不同細胞類型對脂質體-DNA復合物的形成時間和細胞與復合物的孵育時間要求不同。例如，Hela和Siha細胞未明確提及復合物形成時間和孵育時間，而Caco-2細胞的比較好脂質體-DNA復合物形成時間為30min，細胞與復合物孵育時間為6h9。

    emlikiForestvirus相關細胞：利用基于SemlikiForestvirus的RNA和DNA向量研究非病毒細胞穿透肽遞送載體PepFect6與陽離子脂質體Lipofectamine2000的轉染效率，并評估它們對病毒復制的影響。結果表明，PepFect6***證明能夠將大（13-19kbp）構建體轉運穿過細胞膜。但使用PepFect6試劑遞送的DNA分子被發現比使用Lipofectamine2000試劑遞送的DNA分子晚約。***，雖然PepFect6和Lipofectamine2000試劑都可用于alphavirus研究，但PepFect6更受青睞，因為它不會引起正常細胞表型的變化，也不會影響先前轉染細胞中病毒的正常復制***周期12。奶牛子宮內膜原代上皮細胞：應用帶有FAM標記的miRNA-185mimics為報告基因，檢測兩種不同轉染試劑（LipofectamineRNAiMAX與Lipofectamine2000）在細胞接種12、18、24h后的轉染效率。結果顯示，無論使用Lipofectamine2000還是LipofectamineRNAiMAX作為奶牛子宮內膜原代上皮細胞的轉染試劑，各組間12h的轉染效率均極***高于18、24h，18h的轉染效率均極***高于24h；LipofectamineRNAiMAX各時間點的轉染效率均極***高于Lipofectamine2000。使用LipofectamineRNAiMAX作為奶牛子宮內膜原代上皮細胞的轉染試劑時，12h的熒光強度極***高于18、24h。 用二乙基氨基乙基修飾，右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質子化，這使得它可以自組裝成帶負電荷核酸的納米顆粒。

脂質體轉染是一種常用的基因轉染方法，不同類型的細胞在脂質體轉染過程中會表現出不同的特性和差異。以下是對脂質體轉染對不同類型細胞影響差異的詳細分析：

一、轉染效率的差異宮頸*細胞：對于Hela細胞和Siha細胞，當細胞接種密度為每24孔板的每孔1.5×10?個細胞，miRNA量為1μl，Hela細胞中miRNA與脂質體比例為1:0.5，Siha細胞中為1:0.7時，24小時后可獲得比較高轉染效率1。與含血清的培養基相比，只有Siha細胞在無血清培養基中培養時，在轉染前能獲得更高的轉染效率（P＜0.01）1。PC12細胞：lipo2000轉染PC12細胞的比較好轉染條件為lipo2000用量為5μL，DNA2μg，轉染時間為6h，這種條件下的PC12細胞轉染率高達40%，且未影響細胞的正常分泌3。HepG2細胞：陽離子脂質體的擴散系數在lipoplex形成過程中與lipoplex的物理化學特性、lipoplex中質粒DNA的可及性以及每代謝活性的基因表達對數密切相關2。隨著脂質體尺寸的增加，主要的內吞途徑從網格蛋白介導的內吞轉變為脂筏介導的內吞，此外，所有脂質體尺寸均觀察到巨胞飲作用2。骨髓間充質干細胞：脂質體介導的CD基因在鼠骨髓間充質干細胞中成功表達，于轉染48h后達峰值5。

為了在體外和體內可重復地傳遞基因和siRNA，含有核酸的脂質體、脂叢和多叢的配方需要精確組成轉染試劑。吉林轉染試劑價格

轉染是將外來核酸傳遞到真核細胞中以修飾宿主細胞的遺傳組成的過程。內蒙古陽離子轉染試劑

轉染時間對奶牛子宮內膜原代上皮細胞轉染的影響：在奶牛子宮內膜原代上皮細胞中，應用帶有FAM標記的miRNA-185mimics為報告基因，檢測兩種不同轉染試劑（LipofectamineRNAiMAX與Lipofectamine2000）在細胞接種不同時間后的轉染效率33。結果顯示，無論使用哪種轉染試劑，12h的轉染效率均極***高于18、24h，LipofectamineRNAiMAX各時間點的轉染效率均極***高于Lipofectamine2000。并且，使用LipofectamineRNAiMAX作為轉染試劑時，12h的熒光強度也比較高。這說明在奶牛子宮內膜原代上皮細胞中，選擇合適的轉染試劑和轉染時間可以提高轉染效率。同時，該研究未明確轉染對細胞死亡的影響，但可以進一步研究不同轉染條件下細胞的存活率，以確定在提高轉染效率的同時降低細胞死亡的比較好條件。內蒙古陽離子轉染試劑