人類原代干細胞是另一種公認的難以轉染的細胞類型，轉染這種細胞類型的比較大挑戰仍然是效率低和細胞活力低。2015年，王等報道了Lipofectamine 2000和XtremeGENE HP等轉染試劑在人牙周韌帶干細胞中的轉染效率非常低(<6%)，而陽性對照慢病毒載體的轉染效率約為95%。與同一研究中采用的磁輔助轉染技術相比，后者表現出更高的轉染效率(～11%)和更低的毒性。在另一項涉及人骨髓間充質干細胞(hBM-MSC)的研究中，Lipofectamine LTX被證明比TransIT-2020、Lipofectamine 3000和聚乙烯亞胺(PEI)等其他試劑產生比較好的轉染效率(至少高出三倍)，但細胞存活率較低(<50%)。相比之下，使用TransIT-2020試劑可能會獲得更好的結果，該試劑的效率約為30%，細胞回收率高達90%，細胞干性約為95%。另一個難以轉染干細胞的例子是誘導多能干細胞(iPSCs)。在一項比較轉染人類ipsc衍生心肌細胞(hiPSC-CMSs)的不同非病毒方法的研究中，與其他試劑(Lipofectamine 3000、Lipofectamine 2000和基于pei的非脂質體試劑TransporterTM5和PEI25)相比，Lipofectamine STEM顯示出更高的轉染效率(高達32%)，其效率低于20%。是由非離子核酸與陽離子脂質體（CLs）表面結合，形成多層脂質-核酸復合物而形成的。吉林北京轉染試劑

在選擇合適的小RNA分子進行轉染相關功能分析之前，應先確定其實驗需要。例如，siRNA*對一個靶標具有高度特異性，而miRNA具有調節多個下游靶標的潛力。如今，可以人工合成各種類型的短長度寡核苷酸來模仿小RNA分子，以研究這些小RNA分子的敲入/敲入/敲出效應。常用的寡核苷酸可分為模擬物或拮抗劑。模擬物是一種基于rna的小寡核苷酸(可能是piRNA、miRNA或siRNA)，其結構使其能夠與目標mRNA結合以抑制其功能，從而導致特定基因的翻譯抑制。相反，拮抗劑是一種寡核苷酸，它將與互補的小RNA鏈(如miRNA)結合以拮抗其活性，從而增加目標基因的表達。甘肅高分子轉染試劑由于CRISPR/Cas的發現，基因組編輯領域經歷了一場變革。

目前核酸遞送系統的局限性之一是無法深入穿透組織和***，如實體瘤和大腦。通常情況下，只能到達并轉染細胞的外層，從而導致***效果不佳。愛潑斯坦巴爾病毒(EBV)，一種人類**病原體，似乎通過劫持**微環境中的外泌體進行細胞間通訊來克服這一點。外泌體是小的膜囊泡(40 ~ 200nm)，起源于內吞。在被釋放到細胞外環境后，由于其表面存在細胞識別分子，它們可以與鄰近細胞融合。外泌體外泌體是細胞間mRNA、小rna (miRNA)和信號因子的載體，通過經歷細胞內化和釋放的幾個周期，能夠跨越幾層組織。它們可以由多種細胞分泌，包括腫瘤細胞、樹突狀細胞、B細胞、T細胞、上皮細胞和神經元。利用外泌體途徑的一種潛在方法是將脂質體核酸重新包裝到外泌體中。這可以通過靶向外泌體特異性的膜蛋白(如四跨蛋白和膜聯蛋白)并啟動脂質體和外泌體之間的融合事件來實現。

質子泵抑制劑可以通過基于從一個供體蛋白到受體蛋白的能量轉移的物理測量來評估，也可以通過化學測量來評估，在化學測量中，表達的蛋白質與另一種蛋白質之間的相互作用活性可以在刺激時通過適當的報告系統來檢測。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發光共振能量轉移(BRET)，它是熒光共振能量轉移研究質子泵抑制劑的替代方法。多個質粒的共轉染也可以應用于轉染，其中包括將編碼Cas9蛋白和引導RNA的質粒遞送到宿主細胞，使用CRISPR/Cas9基因組工程系統進行基因組編輯。除了使用多個質粒外，雙鏈載體是另一種將不同基因傳遞到宿主細胞的方法。雙鏈載體是一種能夠表達兩種不同基因的載體，通過一個內部核糖體進入位點連接，只有一個啟動子。一項與抗血管生成基因傳遞高度相關的發現是，陽離子脂質體（CLs）選擇性地靶向的血管系統。

在轉染實驗中使用對照對于確定所使用的轉染試劑和核酸的效果和效率至關重要。通常，質粒轉染和寡核苷酸轉染實驗都需要陽性對照、陰性對照、未轉染對照和模擬轉染對照。陽性對照是先前已被證明對轉染實驗產生已知影響的DNA或RNA，例如影響特定下游遺傳靶點的表達。在轉染工作的初始階段，需要一個陽性對照來建立一個優化的轉染方案，之后，陽性對照可以作為參考，與實驗組進行比較。另一方面，陰性對照用于確認宿主細胞中預期的基因表達變化是否歸因于轉染而不是其他原因。在質粒DNA轉染中，陰性對照可以是缺乏DNA和轉染載體的反應，或者兩者都沒有，只有宿主細胞。在小RNA轉染中，陰性對照包含一個非同源序列，該序列通常是一個與靶序列具有相同核苷酸長度和組成但與任何已知哺乳動物基因不同源的打亂序列。未轉染的對照包括不含轉染試劑和核酸的細胞培養，作為宿主細胞基本信息的對照，包括活力、表型，更重要的是，不受轉染影響的靶基因的基線表達水平。模擬轉染是指不含遺傳靶標或核酸的轉染，可以評估轉染試劑(如背景自熒光噪聲)產生的影響。在質粒轉染實驗中，推薦使用空質粒對照作為模擬轉染對照。轉染是將外來核酸傳遞到真核細胞中以修飾宿主細胞的遺傳組成的過程。云南轉染試劑好用

脂質顆粒的加入導致內體DNA釋放增加。吉林北京轉染試劑

在一項將質粒DNA轉染到HUVEC中的研究中，使用包括Effectene和FuGENE 6在內的非脂質體試劑比脂質體試劑DOTAP(18%)產生了更好的轉染效率(34%和33%)。在另一項用質粒DNA轉染HUVEC的研究中，與Effectene和FuGENE 6或HD等非脂質體試劑(48小時時均<20%)相比，脂質體試劑顯示出更高的轉染效率(Lipofectamine LTX在48小時時約為38%，Lipofectamine 2000在48小時時約為23%)。在這些研究中，基于脂質體和非脂質體的試劑轉染HUVECs的效率無法得出結論，主要是由于所用試劑的范圍存在差異。然而，一致的觀察結果表明轉染效率仍然存在無論使用何種試劑，低于40%無疑暗示原代細胞是一種難以轉染的細胞類型。吉林北京轉染試劑