免疫熒光Coons等于1941年初次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術。用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術，因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結合，用于檢測或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質結合，用于檢測或定位抗體，但是在實際工作中熒光抗原技術很少應用，所以人們習慣稱為熒光抗體技術，或稱為免疫熒光技術。以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞（或組織）化學技術。免疫熒光技術可以用于研究免疫相關疾病和自身免疫病。IL-10免疫檢測

免疫熒光實驗的注意事項：對熒光標記的抗體的稀釋，要保證抗體的蛋白有一定的濃度，一般稀釋度不應超過1：20，抗體濃度過低，會導致產生的熒光過弱，影響結果的觀察。染色的溫度和時間需要根據各種不同的標本及抗原而變化，染色時間可以從10min到數小時，一般30min已足夠。染色溫度多采用室溫（25℃左右），高于37℃可加強染色效果，但對不耐熱的抗原（如流行性乙型腦炎病毒）可采用0-2℃的低溫，延長染色時間。低溫染色過夜較37℃30min效果好的多。IL-10免疫檢測熒光抗體技術可用于檢測和定位各種抗原，也可以用于檢測和定位抗體。

熒光的產生：一此化學物質能從外界吸收并儲存能量（如光能、化學能等）而進入激發態，當其從激發態再回復到基態時，過剩的能量可以電磁輻射的形式放射（即發光）。熒光發射的特點是：可產生熒光的分子或原子在接受能量后即刻引起發光；而一旦停止供能，發光（熒光）現象也隨之在瞬間內消失。可以引起發熒光的能量種類很多，由光激發所引起的熒光稱為致熒光。由化學應所引起的稱為化學熒光，由X線或陰極射線引起的分別稱為X線熒光或陰極射線熒光。熒光免疫技術一般應用致熒光物質進行標記。

免疫熒光應用范圍：其應用范圍極其普遍，可以測定內分泌、蛋白質、多肽、核酸、神經遞質、受體、細胞因子、細胞表面抗原、肉瘤標志物、血藥濃度等各種生物活性物質。根據診斷類別，又可分為傳染性疾病、內分泌、藥物檢測、免疫學、血型鑒定等。許多物質都可產生熒光現象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。異硫氰酸熒光素為黃色或橙黃色結晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4，較大吸收光波長為490495nm，較大發射光波長520530nm，呈現明亮的黃綠色熒光。免疫熒光技術可以同時檢測多個目標分子，通過不同顏色的熒光染料進行標記。

細胞免疫熒光實驗注意事項：根據所檢測抗原所在位置來確認是否需要加入 Triton 進行通透。若所檢測抗原表位位于膜蛋白的白外段，則不需要通透；一般 5% BSA 封閉即可達到效果；從加熒光二抗起，后面所有操作步驟盡量避光。縮短在熒光顯微鏡下的觀察時間，1~2 h 為宜。染色后盡快熒光顯微鏡下觀察，若不能可放入 4 ℃ 冰箱避光保存一周。無/弱染色：烤片溫度過高，推薦 56~60 ℃ 1~2 h；一抗是否適用固定液和石蠟切片，使用濃度是否過低，孵育是否時間過短等。熒光抗體法和熒光抗原法都屬于免疫熒光技術的范疇。Glut1免疫熒光IF

免疫熒光技術可以用于研究細胞凋亡和細胞存活。IL-10免疫檢測

細胞免疫熒光步驟對大家來說一定是很陌生的，他是一種抗原抗體反應，好像對我們來說他顯得很遙遠的樣子，因為我們并不了解他能做什么，通過這種技術可以讓我們對抗原或抗體的性質、定位一次來分析出更多的數據。細胞免疫熒光，這對很多人來說都是一次聽說這個東西，也不知道他對我們會有什么好處與壞處，科學研究就是這樣子的，普通老百姓是不會明白其中的道理的，但是這些研究也是確實的在我們的生活中取得了成果，能夠讓大家過的更加舒適。IL-10免疫檢測

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