肉浸液肉湯是一種基礎的微生物培養基,其主要特點和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時,使肉渣完全凝結成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養那些營養要求不是特別高的細菌,如溶血性鏈球菌及其他營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養特征**:在肉浸液肉湯中,細菌可以很好地生長,通常表現為肉湯混濁,這是由于細菌的代謝活動導致的。5.**儲存**:肉浸液肉湯的脫水培養基應避光儲存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養基應蓋緊瓶蓋注意密封儲存。小牛浸液瓊脂的pH值通??刂圃?.4±0.2(25℃),這為微生物生長提供了適宜的酸堿環境 。麥康凱瓊脂平板
細菌固體分離培養基是用于分離和培養細菌的固體培養基,通常包含瓊脂作為凝固劑。這種培養基能夠為細菌提供穩定的生長環境,并有助于觀察微生物的菌落特征。以下是細菌固體分離培養基的一些關鍵特點:1.**成分**:細菌固體分離培養基通常包含蛋白質來源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、無機鹽(如氯化鈉)和瓊脂等。2.**pH值**:培養基的pH值對細菌的生長至關重要,通常需要調節至適宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**滅菌**:培養基在制備過程中需要進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘。4.**用途**:主要用于細菌的分離、計數和鑒定。通過稀釋倒平板法、涂布平板法或平板劃線法等技術,可以從混合的微生物群體中分離出單一的細菌菌落。5.**保存**:培養基通常在室溫、避光、干燥的條件下保存。6.**操作**:在無菌條件下操作,避免污染。使用時,將培養基加熱至液態,然后倒入無菌培養皿中,冷卻凝固后即可用于接種細菌。7.**菌落特征**:不同種類的細菌在固體培養基上形成的菌落具有特定的形態特征,如大小、形狀、顏色、邊緣等,這些特征可以用于細菌的鑒定。改良亮綠瓊脂培養皿卵磷脂和吐溫80的加入使得培養基能夠中和樣品中的防腐劑,這對于化妝品等含有防腐劑的樣品尤為重要。
半固體儲存培養基是一種在微生物學研究和細胞培養領域中扮演重要角色的培養基。它主要用于觀察微生物的動力、菌種的保藏與運輸、厭氧菌的培養、菌種鑒定、細胞培養、噬菌體效價測定以及微生物趨化性研究等。半固體培養基通常由液體培養基加入少量凝固劑制成,例如瓊脂的用量在0.2~0.7%之間。在具體應用上,半固體培養基可以用于以下方面:1.**微生物動力觀察**:通過推測細菌是否有鞭毛來進行鑒定。2.**菌種保藏與運輸**:便于菌種的短時間保存和長途運輸。3.**厭氧菌培養**:適用于厭氧菌的培養,對于研究厭氧微生物的生長和代謝至關重要。4.**菌種鑒定**:通過觀察菌落的形態和生長特性來區分不同的微生物種類。5.**細胞培養**:在細胞生物學領域,半固體培養基廣泛應用于干細胞、細胞克隆、細胞表達和細胞毒性等實驗。6.**噬菌體效價測定**:用于雙層平板法測定噬菌體的效價,是研究病毒與宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趨化性研究**:幫助研究微生物的趨化性,即微生物對化學物質的定向移動反應。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養弧菌科細菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環境,高濃度抑制其他細菌生長。-蔗糖作為可發酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應,檢測細菌產硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細菌利用蔗糖產酸會使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
支原體培養基基礎(含精氨酸)是一種專門用于培養支原體的培養基,它包含精氨酸作為生長因子,適用于那些需要精氨酸才能生長的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱取培養基粉末,按照說明書比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調節pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬單位)。-混勻后分裝到無菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測,特別是口腔支原體的培養和檢測。4.**培養條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養7-14天。5.**觀察指標**:培養基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長時會因代謝產物改變培養基的pH值,導致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產堿,使培養基顏色由橙色變為紅色。6.**質量控制**:通過接種已知的質控菌株來驗證培養基的靈敏度和有效性。水瓊脂培養基的凝膠結構在不同溫度下可能會發生變化,因此需要根據微生物的特性調控培養溫度。膽鹽氯酚紅亮綠瓊脂預裝培養皿
由于雙歧桿菌是厭氧菌,PYG培養基需要在厭氧或微需氧條件下使用,以確保細菌的正常生長 。麥康凱瓊脂平板
DPD培養基(DPDMedium)是一種用于植物組織培養的培養基,其特點是全無機鹽配方,適用于多種植物細胞的培養。以下是DPD培養基的一些關鍵特點:1.**成分**:DPD培養基包含多種無機鹽和有機物,如硝酸銨、硫酸鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸二氫鉀、硫酸亞鐵、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA二鈉)、硫酸錳、鉬酸鈉、硼酸、硫酸鋅、硫酸銅、氯化鈷、碘化鉀、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、肌醇、葉酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激動素等。2.**pH值**:培養基的pH值調整至5.8,以滿足植物細胞生長的需要。3.**用途**:DPD培養基主要用于植物組織的培養,包括植物細胞、組織的生長和發育。4.**配制方法**:通常稱取一定量的DPD培養基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。5.**保存條件**:DPD培養基的保質期通常為三年,應避光、干燥保存,或根據需要保存于2-8°C。6.**注意事項**:在使用時,應檢查培養基是否有顏色變化、蒸發/脫水情況或微生物生長。培養基融化后應立即使用,避免重復融化和長時間放置。7.**用法**:在使用前,需要調整pH值至5.8,并進行高壓滅菌處理。DPD培養基因其成分穩定和適用性廣,在植物組織培養領域有著廣泛的應用。 麥康凱瓊脂平板