基因檢測**前沿的兩種方法是：高通量測序（NGS）和數字PCR(dPCR)。高通量測序技術又稱“下一代”測序技術，可以一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，功能強大，但是實驗操作較復雜，數據分析難度較大，檢測周期長，成本較高。數字PCR技術是目前**精細**靈敏的基因檢測技術，借助微液滴或微腔室，通過單個模板分子的PCR擴增，可實現不依賴于標準曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比，數字PCR靈敏度高、檢測速度快、操作簡便、結果易讀、成本低廉等優勢使其更適合臨床檢測，成為精細醫療實現平民化、大眾化的比較好選擇。此外，數字PCR還在基因表達差異研究、拷貝數變異(CNV)研究、低豐度DNA模板分子的精確定量、甲基化含量鑒定、二代測序輔助建庫、CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證、轉基因成分的檢測、移植排異監控、腸道菌群分析以及***基因組檢測等眾多領域中有著優異的應用。支持多重數字PCR，可選全中文分析軟件。青海實驗室數字PCR安裝

與常規PCR方法相比，數字PCR有如下優勢：1、能夠***定量：常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線，但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可進行***定量。2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。3、靈敏度高：數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個 PCR反應，這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個 反應體系中，***降低了背景信號和***物對反應的干擾，擴增基質效應大大減小。廣東噪音小數字PCR咨詢報價油包水乳化微滴技術，在微管道中利用氣壓驅動生成十萬個微滴，單個微滴體積體積低至皮升級。

數字PCR也叫DigitalPCR（dPCR），是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說，數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值，不受擴增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個數，能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應單元中，使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個單元都會對目標分子進行擴增，然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言，傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中，這也是數字PCR與其比較大的區別。   

二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法，在均相溶液中，當擴增引物增加時，由于擴增引物之間的相互作用，從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增，將可降低引物間相互作用，提高擴增效率。同時還可以實現對于少量模板的有效擴增，得到更多的有效測序數據。CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證CRISPR-Cas9技術的發明，是基因編輯技術的一大突破，但如何驗證實驗是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。線性范圍達到6個數量級，靈敏度低至萬分之一。

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言，數字PCR具備以下優勢:●靈敏度可達到單個核酸分子：檢測限低至0.001%，主要系為數字PCR可以實現靶標DNA/RNA的生物濃縮；●無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量，可對靶分子起始量進行***定量，直接獨處DNA分子 的個數；●適合環境復雜樣品的檢測：終點PCR檢測，不依賴Ct值，不依賴擴增效率，能克服PCR 劑的影響，避免樣品間的交叉 問題，適合各類復雜環境中的樣本進行 定量，如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等；雙通道熒光檢測，支持EvaGreen染料及探針法。青海實驗室數字PCR安裝

采用微滴式技術高達100,000個的微滴。青海實驗室數字PCR安裝

數字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發展起來的一種突破性的核酸定量分析技術。該技術先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應單元中,使每個反應單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應,擴增結束后對每個反應室的熒光信號進行統計學分析,來定量DNA拷貝數。數字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環閾值(Ct),也無需采用內參基因和標準曲線,準確度高、重現性好,可以實現***定量分析。由于其獨特的技術優勢,已經在臨床診斷、轉基因成分定量、單細胞基因表達分析、環境微生物檢測和下一代測序等研究領域顯示出巨大的優勢和應用前景。青海實驗室數字PCR安裝

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