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來源: 發布時間:2025-03-04

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    所有反應孔背景信號好、Ct值都在19~25之間,熒光擴增曲線呈典型的S型,說明本發明實例1提供的血液樣本快速提取法用于熒光PCR擴增的方法具有較好的可行性。將四份不同來源不同的人血液樣本進行熒光PCR擴增檢測,每份樣本平行三次,結果分別如圖2、圖3、圖4、圖5所示,由圖可見,每個樣本的平行實驗,其曲線的Ct值很接近且≤25。說明本發明實例提供的血液樣本快速提取法用于熒光PCR擴增的方法有可靠的重復性以及較好的均一性。實施例2與市場現有的血液基因組提取試劑盒產品對比。本發明的具體步驟如下:將**管顛倒混勻后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸釋放劑(20mM~80mM的氫氧化鈉溶液、~、~、~、~***鈉、~3%甲酰胺),渦旋混勻,然后5000g離心30s,棄上清,獲得細胞沉淀;然后再加入200μL核酸釋放劑,渦旋1min至沉淀完全散開,5000g離心30s,棄上清;向細胞沉淀中加入50μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1min,室溫放置5min,12000g離心30s,取上清液即為提取的血液基因組DNA;取上清液3μL,加入到配制好的熒光PCR反應液,于ABI7500熒光PCR儀中進行擴增。選用某公司的血液基因組提取試劑盒作為方法比對,具體操作過程:將取血管顛倒混勻數次,吸取200μL血液于。

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