本發明涉及生物醫藥領域,涉及一種常溫下長時間口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技術:近年來,采用口腔拭子進行DNA檢驗有逐漸增多的趨勢,由于國內沒有專門用于采集口腔脫落細胞的工具,而只是使用普通的醫用棉簽,而不同的人采集口腔脫落細胞在擦拭次數、力度、檢材剪取量及擴增用的模板量上都存在一定差異,導致了口腔拭子的DNA常溫下保存效果不大穩定,影響了口腔拭子在DNA常溫下保存中的應用。
為規范口腔拭子DNA的采集,提高口腔拭子的DNA保存效率,亟需一種常溫下長時間口腔拭子DNA保存和提取方法。
口腔拭子在使用前一定要先檢查包裝是否破損,如果有破損的話記得不要使用哦。湖北尼龍口腔拭子源頭直供
用口腔拭子做親子鑒定與抽血結果哪個好?對于親子鑒定,委托人往往是慎重而嚴肅的,因為親子鑒定結果的出爐,能夠說明很多問題,并且還會帶來一系列化學反應,比如丈夫可以通過親子鑒定了解孩子是否自己親生,從而確認自己是戴了“綠帽子”還是庸人自擾,而作為妻子,則可以通過親子鑒定證明自己的清白,維護個人尊嚴和名聲。用口腔拭子做親子鑒定與抽血結果哪個好?華曦司法鑒定所的**告訴我們,DNA鑒定需要提供的檢材類型是多樣化的,常規檢材有:口腔黏膜、血液、血斑、帶有***的毛發。特殊檢材包括**、精斑、牙刷、胎兒絨毛、胎兒羊水、流產物、組織、臍帶血等。口腔拭子就是用單頭的醫用棉簽也稱為棉棒,通過擦拭口腔來采集口腔粘膜上皮細胞。與抽血采樣相比,口腔拭子的特點是簡便而且無創、無痛。用口腔拭子做親子鑒定和抽血用血液做DNA鑒定是同樣準確的,沒有什么區別,兩者的DNA鑒定結果是完全一致的,因為一個人的DNA無論來自于口腔細胞還是血液中的白細胞都是一樣的,不會因為用的檢材的不同而出現不同的鑒定結果。 黑龍江鼻拭子口腔拭子檢測口腔拭子的優點是將產品進行環氧乙烷滅菌。
紫藍色結節、瘺孔等,分泌物量、性質、顏色、氣味等,陰道有無橫隔、縱隔、斜隔、狹窄、閉鎖、雙陰道等畸形,宮頸大小、形狀、色澤,有無糜爛、舊裂、贅生物、紫藍色結節及接觸性出血等,宮頸管分泌物性狀,宮頸陰道段長度及雙宮頸畸形等。盆腔檢查檢查前先排便,排便困難者可先導尿及服用緩瀉劑,有陰道出血者需先消毒外陰并戴無菌手套;月經期一般不做盆腔及陰道檢查;未婚者一般*作肛門指診檢查。
(1)雙合診:即陰道腹部雙合診。檢查者戴無菌手套,以示指、中指蘸潤滑液后順陰道后壁輕輕插入,檢查陰道有無腫塊、狹窄、瘢痕、彈性等,子宮頸高度、大小、質地、硬度,有無舉痛,后穹窿是否飽滿,軟硬度,有無彈性,結節、腫塊、浸潤、觸痛。然后將另1手置于下腹壁與陰道內手指配合檢查盆腔生殖器先作宮體觸診,注意子宮體大小、位置、形狀、硬度、活動度及有無壓痛。將內診指放在一側穹窿,雙手檢查附件與宮旁組織有無增厚、壓痛、包塊,如有腫塊需查清大小、活動度、質地、形狀,有無觸痛以及與子宮有無粘連,有無向周圍組織臟器浸潤等,先查不痛的一側,然后再查對側。
(2)三合診:又稱陰道直腸腹部三合診。用示指插入陰道、中指插入肛門內觸診。
本發明涉及一種快速提取血液和口腔拭子基因組DNA的方法。背景技術:近年來,隨著熒光PCR技術的不斷成熟。該技術在科研及檢驗領域得到了應用,成為分子生物學領域不可或缺的一項重要技術。在進行遺傳背景分析過程中,血液、唾液和口腔拭子成為重要的生物分析樣本。但是,由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反應物,例如血液中含有血紅素,蛋白質,脂肪,抗凝劑等,唾液和口腔拭子含有蛋白質,脂肪,抗凝劑等,使得用血液、唾液和口腔拭子直接進行熒光PCR反應變得尤為困難。因此,現在臨床上往往先要從血液、唾液和口腔拭子樣本中純化出DNA,才能進行樣本的DNA擴增。提取血液、唾液和口腔拭子基因組的方法種類非常多,傳統酚氯仿抽提法,高鹽鹽析法,模離心柱吸附法,磁珠法,等等。經典的血液核酸提取方法包括幾個過程。1.通過低滲液漲破紅細胞,將血紅素物質釋放出來,然后離心,清洗去除血紅素。2.通過裂解液裂解白細胞,釋放核酸物質。3.通過離心柱或納米磁珠特異性吸附核酸物質,去除其他雜質。4.通過漂洗液洗掉掛在離心柱或納米磁珠表面的化學試劑殘留和蛋白殘留。5.加入洗脫液將核酸從離心柱或納米磁珠上洗脫下來。 這款口腔拭子采用國際通用的方便消滅細菌的紙塑包裝。
加入20μteinaseK溶液,混勻。加入200μL緩沖液GB,充分顛倒混勻,在56℃放置14min(期間顛倒混合樣品數次),溶液應變清亮,若未完全變清亮,延長裂解時間至完全變清亮。加人200μL無水乙醇,充分振蕩混勻10s,此時可能會出現絮狀沉淀。將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm離心30s,倒掉廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入無水乙醇),12,000rpm離心30s,棄廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入無水乙醇),12,000rpm離心30s,棄廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)離心2min。將吸附柱放置新的,以徹底晾干吸附柱中殘余的漂洗液。向吸附柱中懸空滴加50~200μL洗脫緩沖液,室溫放置2~5分鐘,12,000rpm(~13,400×g)離心2min,將溶液收集到離心管中,測定濃度及純度后,取3μL,加入到配制好的熒光PCR反應液,于ABI7500熒光PCR儀中進行擴增。用本發明和對照產品對8份樣本同時進行熒光PCR擴增。結果如圖6,本發明所有反應孔背景信號好、Ct值都在21~25之間,熒光擴增曲線呈典型的S型。將拭子伸進口腔,在口腔內壁來回掛拭多次,然后將拭子自然晾干,包裝起來送往檢測機構檢測即可。云南咽拭子口腔拭子供應商家
口腔拭子適用于采集任何年齡段人群的DNA樣本。湖北尼龍口腔拭子源頭直供
相對濕度40%~90%的無腐蝕性氣體、通風良好、陰涼干燥、清潔的環境中。CY-96000型鼻腔采樣拭子:供醫療機構采集患者鼻腔內***的***及DNA樣本。***采樣拭子:用于流感、豬流感、禽流感、手足口等呼吸道及腸道***的鼻部及咽喉部采樣。產品組成:⑴尼龍植絨拭子。(用于采樣,釋放量高達90%以上)三、產品特點:①采用國際通用的方便***的紙塑包裝。②γ射線***,確保無菌。③大包裝盒內的每套獨立包裝,方便使用。④針對不同的標本類型選用了不同的保存液。采樣管(細菌、***、支原體、衣原體)產品優勢:1、采集拭子特點:采集系統采用尼龍植絨拭子,對微生物***害,能很大程度的增加標本的采集及釋放量。大量臨床實驗表明:與普通無菌棉拭子相比,尼龍植絨拭子有著更好的對臨床微生物標本的采集與運送效果.尤其是對于那些不能及時送檢、放置時間過長的標本而言更是如此。拭子的優勢:①獨有的噴射式植入尼龍纖維技術,增加標本的采集及釋放量。②拭子全長,塑料桿上有獨特的可折斷設計。③絨毛質地可采集更多目標分析物。④沒有標本殘量,加快標本過程處理。⑤拭子為***獨立包裝。湖北尼龍口腔拭子源頭直供
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