在精子形態學檢查中,通過CASA系統對精子形態學特征進行分析,有些特征(細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇,這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結果一致性較差[10]。4結論和展望計算機輔助**分析具有較好的可靠性、重復性和穩定性,與傳統的光學顯微鏡目測估計相比,更具有快速方便、對比性強、便于交流等明顯優點[11],常規**檢查無法測定精子微細運動特點,顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優越性。王益鑫亦發現,部分手工**檢查正常的不育患者,進行**全自動分析及生化檢測,均發現明顯異常[12]。因此,CASA系統在男性生殖能力檢驗方面具有重要的實際應用意義。IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計算精子的各項參數,減少了人工操作的誤差。美國綿羊精子分析VSL
CASA系統雖然有諸多優點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統進行**分析應注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數具有溫度敏感性,因此要求計數池應于分析儀恒溫板上預溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現錯誤的結果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。美國前向運動精子分析VCLHamilton Thorne精子分析儀采用先進的光學成像,能夠實時分析精子的動力學參數,提供有效的精子質量評估。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質量數據輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜偷妮d玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。IVOS能提供:精確、客觀、具有重復性的結果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節省成本。[1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態分析系統。HamiltonThorne的CASA系統適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產業、制藥公司等各種領域,成為了精液分析業的金標準??梢詰糜诎ㄈ祟?、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。
方法:使用兩種已知濃度的質控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數精液的結果。結果:計數乳膠珠時,CellVU計數池的結果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數池和Makler計數池結果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統結果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數精液時,CellVU計數池與CASA系統結果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數池和Makler計數池結果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數池、CASA系統與血細胞計數池、Makler計數池結果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結論:計數精液時,CASA系統與CellVU計數結果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數方法。全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗水平,廣泛應用于泌尿科,男性科以及計劃生育、優生優育研究等。
醫生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節欲時間長者,可呈淡黃色,若出現鮮紅色.暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時之內應液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數應超過2000萬/毫升。排精后1小時內活動精>=50%。世界衛生組織推薦精子活動力分為四級:0級:不活動;1級:精子原地擺動;2級:有中等的前向運動;3級:前向運動活躍,快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子>=40%~50%.精子形態:畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論,應對精子數量活力活動率液化時間畸形率等多方面進行綜合能力分析。采集精液前5~7天內必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。美國綿羊精子分析DCL
?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數,前向性(STR)?:平均路徑的直線性。美國綿羊精子分析VSL
CASA系統進行**分析應注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對比度閾值:由于分析儀是根據灰度的高低來判斷精子的真偽,對亮度和對比度要求特別高,檢測時應多次試用,尋找能準確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準確性受**中細胞成份和非精子的顆粒物質的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質的影響[9],這些也是需要注意的。對于系統誤認為精子的非精子成分,如精原細胞、白細胞和非白細胞顆粒等,可人為準確記數后在可刪除雜質一欄將其舍去。3.3出現1次異常結果應間隔復查反復檢查2?3次方能得出比較正確的結果。3.4對于無精子的患者應仔細進行視野檢查注意不要將雜質誤認為精子計數在內,應將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認無精后再出報告。美國綿羊精子分析VSL