精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理：將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準(zhǔn)確率有待提高。廣州山羊精子分析WOB

精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合，**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù)，通過顯微鏡放大后，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù)，對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析，由計(jì)算機(jī)處理后，打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測[1]。優(yōu)點(diǎn)：操作簡便，用量少，檢測速度快，重復(fù)性優(yōu)于人工檢測，并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等，還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點(diǎn)：影響分析結(jié)果的因素較多，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外，不同的精子計(jì)數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。上海計(jì)數(shù)精子分析DAPHamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能，能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本，提高工作效率。

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級：0級：不活動(dòng)；1級：精子原地?cái)[動(dòng)；2級：有中等的前向運(yùn)動(dòng)；3級：前向運(yùn)動(dòng)活躍，快速直線運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論，應(yīng)對精子數(shù)量活力活動(dòng)率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。

二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn)：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān)，其活力不足，可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時(shí)無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。Hamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像，能夠?qū)崟r(shí)分析精子的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，提供有效的精子質(zhì)量評估。

CASA精子運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)軌跡特征主要參數(shù)有：①軌跡速度（VCL）：也稱曲線速度，即精子頭部沿其實(shí)際行走曲線的運(yùn)動(dòng)速度。②平均路徑速度（VAP）：精子頭沿其空間平均軌跡的運(yùn)動(dòng)速度，這種平均軌跡是計(jì)算機(jī)將精子運(yùn)動(dòng)的實(shí)際軌跡平均后計(jì)算出來的，可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運(yùn)動(dòng)速度（VSL）：也稱前向運(yùn)動(dòng)速度，即精子頭部直線移動(dòng)距離的速度。④直線性（LIN）：也稱線性度，為精子運(yùn)動(dòng)曲線的直線分離度，即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度（ALH）：精子頭實(shí)際運(yùn)動(dòng)軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度，可以是平均值，也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計(jì)算方法不一致，因此相互之間不可直接比較。⑥前向性（STR）：也稱直線性，計(jì)算公式為VSL/VAP，亦即精子運(yùn)動(dòng)平均路徑的直線分離度。⑦擺動(dòng)性（WOB）：精子頭沿其實(shí)際運(yùn)動(dòng)軌跡的空間平均路徑擺動(dòng)的尺度，計(jì)算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率（BCF）：也稱擺動(dòng)頻率，即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動(dòng)角度（MAD）：精子頭部沿其運(yùn)動(dòng)軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均值。⑩運(yùn)動(dòng)精子密度：每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性。快速運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源

IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點(diǎn)，能夠捕捉到微小的細(xì)節(jié)和變化，進(jìn)一步提高了精子分析的準(zhǔn)確性。廣州山羊精子分析WOB

全自動(dòng)的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出。可以使用一次性的和可重復(fù)的載玻片，深度從10um～100um。每次分析捕捉100幀圖像，掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。IVOS能提供：精確、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果。高速分析，在60Hz下半秒掃描30幀，為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。[1]主要功能IVOS自動(dòng)精子活動(dòng)、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域，成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)。可以應(yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動(dòng)物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。廣州山羊精子分析WOB