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上海紡錘體卵冷凍研究

來源: 發布時間:2025-02-13

液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數碼成像技術結合起來的成像系統,能夠觀測到具有雙折性特征的細胞結構,如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統無需對細胞進行固定和染色,因此能夠評估卵母細胞的質量與紡錘體、透明帶等的相關性。在紡錘體卵冷凍研究中,Polscope成像系統可用于實時監測冷凍過程中紡錘體的形態變化,評估冷凍保護劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外,解凍后也可利用Polscope成像系統評估紡錘體的恢復情況和穩定性,從而篩選出高質量的卵母細胞進行后續操作。紡錘體的異??赡軐е录毎至堰^程中的停滯或凋亡。上海紡錘體卵冷凍研究

上海紡錘體卵冷凍研究,紡錘體

Oosight影像分析系統采用液晶偏光成像技術,無需對卵母細胞進行染色,即可實時、清晰、高對比度地進行紡錘體結構和透明帶成像,對ICSI、核移植操作、卵母細胞質量評價等有很好的輔助作用。

主要應用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細胞,避免卵的破裂損傷,增強胚胎的發育潛能。卵評估:利用定量的分析數據對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。體外成熟評估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據采用的是準確的識別紡錘體,而非不準確的極體。質量控制:利用定量的分析數據對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。

核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質,使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對冷凍的初級卵母細胞進行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測胚胎中紡錘體的發育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養箱的顯微鏡)??梢詫θ旧w非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測量卵母細胞的透明帶;準確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態 昆明成熟卵母細胞紡錘體Hoechst染料紡錘體形成和功能的調控涉及多個信號通路。

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近年來,隨著玻璃化冷凍技術的不斷發展,成熟卵母細胞紡錘體的冷凍保存研究取得了進展。研究表明,采用玻璃化冷凍法冷凍保存的成熟卵母細胞,在解凍后其紡錘體和染色體的形態及功能均能得到較好的保持。這主要得益于玻璃化冷凍過程中避免了冰晶形成對細胞的損傷,以及冷凍保護劑對細胞的有效保護。然而,值得注意的是,盡管玻璃化冷凍法在提高解凍存活率和妊娠成功率方面取得了成效,但仍存在一些問題。例如,冷凍過程中紡錘體的微管結構可能受到低溫的影響而發生解聚,導致染色體分離異常。此外,冷凍保護劑的毒性也可能對卵母細胞造成一定的損傷。為了克服這些問題,研究者們進行了大量的實驗和優化工作。例如,通過改進冷凍保護劑的配方和濃度,降低其對細胞的毒性;通過優化冷凍速率和程序,減少冷凍過程中對細胞的機械損傷;以及通過篩選和評估不同冷凍載體和保存時間對卵母細胞冷凍效果的影響,尋找好的冷凍保存條件。

    在有絲分裂中,紡錘體的形成與功能至關重要。首先,在有絲分裂前期,中心體復制并分離至細胞兩極,形成紡錘體的兩極。隨后,微管從兩極向中心區域延伸,形成紡錘體的主干。在中期,染色體在紡錘絲的牽引下,自動在赤道板排列整齊。當細胞進入分裂后期,紡錘體微管收縮,將染色體牽引至兩極,形成兩組數目相等的姐妹染色單體。這一過程確保了遺傳信息的準確傳遞,避免了染色體分離錯誤導致的遺傳異常。此外,紡錘體還決定了胞質分裂的分裂面。在染色體分裂的同時,紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,而是停弛在紡錘體中心,形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區域為兩組極性相反的微管交疊區,稱為紡錘中心區,它決定了接下來的胞質分裂面。胞質分裂開始于分裂后期的較晚期,一般結束于分裂末期后1-2小時,此期間兩個子細胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過精確控制胞質分裂面的位置,確保了細胞分裂的對稱性和穩定性。 紡錘體微管的排列和穩定性受到細胞骨架的支撐。

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    紡錘體的精密導航作用主要體現在以下幾個方面:微管的動態生長與縮短:紡錘體微管的動態生長和縮短是紡錘體形態變化的基礎。這種動態變化不僅使紡錘體能夠適應不同階段的細胞分裂需求,還能夠確保染色體在分裂過程中的精確定位。動粒微管與染色體的結合:動粒微管與染色體動粒的結合是紡錘體牽引染色體的關鍵步驟。動粒微管通過驅動蛋白和動力蛋白的介導,與染色體動粒緊密結合,從而實現了染色體在紡錘體中的精確定位和牽引。紡錘體微管的極性排列:紡錘體微管的極性排列決定了染色體分裂的方向和胞質分裂面的位置。紡錘體微管從兩極向中心區域延伸,形成類似紡錘的形狀,確保了染色體在分裂過程中能夠沿著正確的方向分離。同時,紡錘中心體的形成也決定了胞質分裂面的位置,使細胞分裂更加對稱和穩定。紡錘體組裝檢查點的調控:紡錘體組裝檢查點是細胞周期調控中的重要環節,它確保了紡錘體在分裂過程中的完整性和準確性。當紡錘體組裝不完全或染色體動粒未能被所有動粒微管捕獲時,紡錘體組裝檢查點會被激發,阻止細胞進入分裂后期。這種調控機制避免了染色體分離錯誤導致的遺傳異常和細胞死亡。 紡錘體在細胞分裂中扮演關鍵角色,確保遺傳物質均等分配。美國Hamilton Thorne紡錘體玻璃底培養皿

紡錘體微管的正極朝向細胞兩極,負極則靠近染色體。上海紡錘體卵冷凍研究

在有絲分裂過程中,紡錘體的形成和功能是高度協調的。從前期到中期,紡錘體逐漸成熟,染色體被精確排列在細胞的中間區域。到了后期和末期,紡錘體開始分解,將染色體拉向細胞的兩極,并完成胞質分裂。這一過程中,紡錘體的微管通過縮短和伸長來協調染色體的移動和定位,確保遺傳信息的準確傳遞。雖然無絲分裂過程中不形成明顯的紡錘體結構,但紡錘體的相關成分(如微管和動力蛋白)仍在細胞分裂中發揮作用。例如,在質體分裂中,紡錘體成分同樣起到了精確定位和運動染色體的作用。在減數分裂過程中,紡錘體的形成和功能更加復雜。以人卵母細胞為例,其紡錘體在減數分裂過程中會經歷一段較長時間的“多極紡錘體”階段,而后才形成雙極狀紡錘體。這一過程需要多種關鍵蛋白(如HAUS6、KIF11和KIF18A)的參與和調控。紡錘體的正確組裝和雙極化對于保證卵母細胞的正常發育和受精至關重要。上海紡錘體卵冷凍研究