1.基本檢查：是確定精液變量穩定的常規方法，不僅是男科實驗室，任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數板的方法，但計數的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優先方法，伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數據表明，鑒別快速前向運動精子非常重要。因此，關于精子活力分級，第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別，但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調，精子形態學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態率的判斷，則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成；對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數20%的精液，應單獨計算并在報告中注明；精子分析儀節省時間，提高實驗室的工作效率，讓醫生和科研人員更快速地獲取實驗分析結果。南京Hamilton Thorne精子分析WOB

擴展性檢查：可以在某些情況下由實驗室選擇或根據臨床醫生的特殊要求而使用的項目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學和炎癥細胞等相關檢查項目。提出了基因突變是導致不育和精液常規檢查異常的原因。新增了精液相關細胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內容。在精液參數異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報道指出其與精液參數正常男性的不育有關。由于與精液質量相關，精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補充內容，已成為男科學基礎和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進行了描述。新增了基因和基因組測序內容。臨床上，越來越多的人意識到染色體異常[數量異常、結構異常(包括微缺失和微重復)]和基因突變是導致各種男性不育癥的基礎病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規在醫學遺傳學實驗室進行，但一些男科實驗室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響，泌尿男科醫生可能提出對精液中的趨化因子和細胞因子進行評估。本手冊納入了精液中白細胞介素檢測方法。南京魚精子分析DSLHamilton Thorne精子分析儀采用先進的光學成像，能夠實時分析精子的動力學參數，提供有效的精子質量評估。

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關，其活力不足，可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。

精子分析儀是計算機技術和圖像處理技術結合的**分析儀器設備，通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內精子的運行軌跡，客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數。計算機輔助**分析儀由硬件系統和軟件系統組成。硬件系統主要由顯微攝像系統、圖像采集系統、恒溫系統、計算機處理系統等四大系統構成。此外，儀器一般配有**樣品盒，以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統：由顯微鏡及CCD組成。可以將標本信號通過顯微放大由CCD傳輸到計算機2.圖像采集系統：由圖像卡構成，其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預處理后，將成熟信號輸送到計算機。3.恒溫系統：由加溫和保溫設備組成。加溫是通過熱吹風機不斷將適宜的溫度熱風鼓入封閉保溫罩內，提供穩定、可靠的檢查環境。4.計算機系統：對圖像信號進行***系統的加工處理，對獲得的數據進行輸出和存儲的設備。軟件系統采用**的精子質量分析軟件，利用現代化的計算機識別技術和圖像處理技術，對精子的動靜態特征進行***的量化分析，對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進行量的檢測分析精子分析儀與人工方法相比具有客觀，高效，高精度的優點。

七、精子形態檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%；凝集精子：＜10%；未成熟精細胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時已進入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態。2.精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時，精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC)：＜5個/HP(高倍鏡視野)；紅細胞(RBC)：0-偶見/HP。[臨床意義]1．精液中白細胞增多，常見于精囊炎、前列腺炎及結核等。2．精液中紅細胞增多，常見于精囊結核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞，對生殖系*有診斷意義。選擇合適的CASA檢測原理和設備，確保幀率要求，避免因設備問題影響檢測結果?。南京Hamilton Thorne精子分析WOB

Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質量評估設備。南京Hamilton Thorne精子分析WOB

通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運動精子百分率上的相關性較低］。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較，其結果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數；變異系數（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術（授精IVF）的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能；同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。南京Hamilton Thorne精子分析WOB