液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數碼成像技術結合起來的成像系統,能夠觀測到具有雙折性特征的細胞結構,如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統無需對細胞進行固定和染色,因此能夠評估卵母細胞的質量與紡錘體、透明帶等的相關性。在紡錘體卵冷凍研究中,Polscope成像系統可用于實時監測冷凍過程中紡錘體的形態變化,評估冷凍保護劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外,解凍后也可利用Polscope成像系統評估紡錘體的恢復情況和穩定性,從而篩選出高質量的卵母細胞進行后續操作。紡錘體在細胞分裂完成后迅速解體,為細胞質分裂提供空間。武漢核移植紡錘體觀測儀
紡錘體的雙極化是卵母細胞減數分裂過程中的關鍵事件之一。近年來,我國學者在人類卵母細胞紡錘體雙極化機制研究方面取得了重要進展。通過高分辨成像技術,研究者們揭示了人類卵母細胞紡錘體雙極化的獨特機制,并發現了調控此過程的關鍵蛋白。這些研究成果不僅為雙折射性紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角和思路,也為臨床生殖障礙疾病的診療提供了科學依據。隨著偏光成像技術和冷凍保護劑研究的不斷深入,未來有望開發出更加高效、安全的卵母細胞冷凍保存方案。例如,通過改進冷凍速率和程序、優化保護劑配方等手段,進一步減輕冷凍損傷,提高解凍后卵母細胞的存活率和發育潛能。上海哺乳動物紡錘體玻璃底培養皿紡錘體在細胞分裂過程中經歷明顯的形態和結構變化。
如何觀察紡錘體呢?
在普通光學顯微鏡下,人類卵母細胞是半透明的,無法對紡錘體的結構進行觀察和分析。傳統方法是用一種特異的DNA熒光染料對卵母細胞染色,在紫外光下可顯示紡錘體,這種免疫熒光方法對卵母細胞有損傷,不能應用于臨床。為了更好的觀測紡錘體,美國海洋生物學實驗室的R.Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性,開發出偏振光顯微鏡。現今,偏振光顯微鏡已經發展成為一種無創性的觀察和分析紡錘體動態結構的顯微觀測系統,我們也叫它紡錘體觀測儀。它不僅能對雙折射性紡錘體信號的有無進行定性分析,還能對信號的強弱進行定量分析。
冷凍電鏡技術(Cryo-EM)近年來在結構生物學領域取得了重大突破,也為紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。通過將生物樣品冷凍至極低溫并在電子顯微鏡下進行觀察和成像,冷凍電鏡能夠揭示生物大分子的高分辨率結構,包括紡錘體微管等精細結構。這一技術不僅克服了傳統電鏡技術對樣品制備的嚴格要求,還能夠在接近生理狀態下觀察紡錘體的形態和功能,為無損觀察紡錘體提供了強有力的技術支持。無損觀察紡錘體技術能夠實時監測冷凍過程中紡錘體的形態變化,從而準確評估冷凍保存的效果。通過對比冷凍前后紡錘體的形態和穩定性,研究者可以優化冷凍保護劑的配方和濃度,以及改進冷凍程序,減少冷凍損傷,提高解凍后卵母細胞的存活率和發育潛能。紡錘體在細胞分裂末期逐漸解體,為細胞質分裂做準備。
為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷,研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細胞骨架保護劑,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能夠穩定微管結構,防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術,研究者可以實時監測紫杉醇對紡錘體的保護效果,評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外,還可以進一步觀察解凍后卵母細胞的發育潛能,為臨床應用提供可靠依據。無需對細胞進行固定和染色,保持細胞的活性與完整性。能夠實時監測紡錘體的形態變化,評估冷凍效果。能夠捕捉到細微的紡錘體形態變化,提高評估的準確性。紡錘體微管的動態變化受到細胞周期蛋白的調控。紡錘體實時成像紡錘體Oosight Meta
紡錘體的功能異常可能導致細胞分裂錯誤,引發遺傳疾病。武漢核移植紡錘體觀測儀
紡錘體是如何形成的(2)
動粒微管連接染色體動粒與位于兩極的中心體。在有絲分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反兩個方向的中心體伸出的動粒微管就會隨機地與染色體上的動粒結合而俘獲染色體,微管**終附著在動粒上,動粒微管把染色體和紡錘體連接在一起。在細胞分裂期的后期,分開后的染色單體被拉向兩極。染色體移動由兩個相互獨立且同步進行的過程所介導,分別為過程A和過程B。在過程A中,在連接微管和動粒的馬達蛋白的作用下,動粒微管解聚縮短,在動粒處產生的拉力使染色體移向兩極。極間微管是從一個中心體伸出的某些微管與從另一個中心體伸出的微管相互作用,阻止了它們的解聚,從而使微管結構相對穩定,兩套微管的這種結合形成了有絲分裂紡錘體的基本框架,具有典型的兩極形態,產生這些微管的兩個中心體稱為紡錘極,這些相互作用的微管被稱為極間微管。在有絲分裂后期過程B中,極間微管的伸長和相互間的滑行使紡錘極向兩極方向移動。星體微管從中心體向周圍呈輻射狀分布,在有絲分裂后期過程B中,每一紡錘極上向外伸展的星體微管發出向外的力,拉動兩個紡錘極向兩極方向移動。
武漢核移植紡錘體觀測儀
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