保存和運輸免疫組化樣本的關(guān)鍵點:1、快速固定(<20分鐘)于適量(樣本體積20倍)固定液中。2、使用適宜固定劑(如10%中性福爾馬林),掌握合適固定時間(6-24小時)。3、固定后室溫穩(wěn)定至少兩天,冰凍樣本-80℃保存,運輸時用干冰或冰袋維持低溫。4、完整標注樣本信息,確保記錄無誤。5、選平底容器防損。6、定期更換固定液。7、運輸時密封防污染損壞。8、石蠟包埋前完成脫水、透明步驟。9、建議備份樣本。10、遵守相關(guān)法規(guī)和生物安全標準。合理措施確保樣本質(zhì)量與實驗準確性。免疫組化的結(jié)果判讀需要注意那些細節(jié)?揚州病理切片免疫組化分析
免疫組化即用型二步法的具體實驗流程步驟簡介:1、脫蠟、水化組織切片;2、根據(jù)所應(yīng)用的一抗的特殊要求,對組織切片進行預(yù)處理;3、0.3%或3%H2O2去離子水孵育5分鐘-30分鐘,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,PBS或TBS沖洗;4、滴加一抗,室溫或37℃孵育30~60分鐘,或4℃過夜,PBS或TBS浸洗3分鐘×5次;5、滴加enhangcer增強劑,37℃30min,PBS或TBS浸洗3分鐘×5次;6、滴加通用型IgG抗體-Fab段-HRP多聚體,室溫/37℃孵育30分鐘-1h,PBS/TBS沖洗,3分鐘×5次;7、應(yīng)用DAB溶液顯色;8、蒸餾水沖洗、復(fù)染、脫水、透明、封片。揚州免疫組化實驗流程優(yōu)化的抗原修復(fù)步驟能明顯提升免疫組化染色的敏感性和特異性。
免疫組化技術(shù)在基因表達調(diào)控研究中扮演著至關(guān)重要的角色,在基因表達調(diào)控研究中,免疫組化技術(shù)的主要作用體現(xiàn)在以下幾個方面:1、定位分析:通過特定的抗體,免疫組化技術(shù)可以精確地定位到細胞或組織中特定蛋白質(zhì)的分布情況,從而了解相關(guān)基因的表達位置和表達水平。2、表達模式研究:通過比較不同條件下(如正常與病變組織、不同發(fā)育階段等)蛋白質(zhì)的表達情況,免疫組化技術(shù)可以幫助研究者揭示基因表達的變化規(guī)律,進而理解基因表達的調(diào)控機制。3、功能研究:通過免疫組化技術(shù)檢測特定蛋白質(zhì)的表達和定位,研究者可以推斷這些蛋白質(zhì)在細胞或組織中的功能,進而推測相關(guān)基因的功能。4、與分子生物學(xué)技術(shù)的結(jié)合:免疫組化技術(shù)可以與其他分子生物學(xué)技術(shù)(如PCR、基因芯片等)相結(jié)合,從多個角度研究基因表達調(diào)控,提供更準確、深入的信息。
一份免疫組化的報告,里面會有很多的加號(+),和減號(-)。那么這些加號和減號是什么意思呢?加號越多是說我們的疾病嚴重程度越高嗎?不用擔(dān)心,并不是這樣的。免疫組化中的(+),也就是指陽性,指切片中的某些細胞表達特定的免疫標記,而(-)即陰性,指這些細胞不表達這些免疫標記。這些免疫標記的陽性與陰性表示了細胞的來源,也就是說我們是通過這些不同標記的陽性陰性來認識這些細胞,從而給這些細胞貼上"名片”的。所以這些(+)(-)與疾病的嚴重程度或者惡性程度沒有關(guān)系。免疫組化對Ca分期有重要作用。
免疫組化鏡檢:在進行鏡檢前可以通過相關(guān)的資料進行查詢,進行指導(dǎo)檢查到抗體的表達部位有細胞間質(zhì)、細胞膜、細胞漿、核膜、細胞核以及在其中的多個部位表達(如:MPO抗體表達在細胞膜、細胞漿、核膜、細胞核上)和表達組織(如:VWF抗體在血管壁上表達,呈現(xiàn)環(huán)形)。實際操作過程中,在顯微鏡下觀察時,先在4倍鏡下查找組織及其范圍,然后查看整個組織確定陽性產(chǎn)物的表達部位,然后將陽性產(chǎn)物表達部位置于視野正中,換高倍鏡觀察。免疫組化能分辨組織中各類細胞標志物。江蘇免疫組化
免疫組化對評估診斷效果有一定意義。揚州病理切片免疫組化分析
免疫組化技術(shù),是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理—抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry),是研究蛋白質(zhì)在組織細胞中分布、功能狀態(tài)及動態(tài)變化的強有力工具。免疫組化技術(shù)具有高靈敏度、高選擇性和無放射性污染的特點,其結(jié)果容易數(shù)字化和圖像處理,是一種實用性和準確性高的分子生物學(xué)技術(shù)。在臨床醫(yī)學(xué)研究中,免疫組化被廣泛應(yīng)用于Ca組織結(jié)構(gòu)及特異性結(jié)構(gòu)物的鑒定,幫助醫(yī)生確定病變的類型、分級和分期,進一步指導(dǎo)臨床醫(yī)療和預(yù)后判斷。揚州病理切片免疫組化分析