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遼寧嘉安健達二代測序應用

來源: 發布時間:2025-01-18

什么是chip-seq?

Chip-seq即染色質免疫共沉淀測序(ChromatinImmunoprecipitationSequencing),是一種結合染色質免疫共沉淀(ChIP)技術與高通量測序(NGS)的分子生物學技術,可在全基因組范圍內檢測與組蛋白、轉錄因子等相互作用的DNA區段。以下是具體介紹:

技術原理

染色質固定:使用甲醛等試劑交聯細胞內的蛋白質和DNA,使蛋白-DNA相互作用的復合物固定,從而保留它們在體內的結合狀態。

染色質片段化:采用超聲波或酶切的方法將染色質剪切成適合測序的小片段,通常片段大小在200-500bp范圍內。免疫共沉淀:利用特異性抗體富集與目標蛋白結合的DNA片段,通過抗體與目標蛋白的特異性結合,將蛋白-DNA復合物沉淀下來。

交聯逆轉與DNA提取:通過加熱或化學方法逆轉蛋白-DNA交聯,使DNA與蛋白質分離,然后提取并純化DNA。

文庫構建與高通量測序:對純化的DNA片段進行測序文庫制備,在DNA片段兩端連接特定的寡核苷酸接頭,隨后在高通量測序平臺上進行測序。

數據分析:包括序列比對,將測序讀段映射到參考基因組;峰值調用,識別蛋白質結合的富集區域;功能注釋,分析峰的位置和功能等。 二代測序的流程有哪些?遼寧嘉安健達二代測序應用

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二代測序用于蛋白組測序的發展前景?

多組學整合更緊密:未來二代測序與蛋白組測序會和其他組學技術(如代謝組學、表觀基因組學等)進一步深度整合,從多個層面***地解析生命活動分子機制,例如在疾病研究中,綜合分析基因轉錄、蛋白質表達及代謝產物變化等,為疾病的早期診斷、精細***提供更完善的依據。

技術優化提升準確性:一方面,二代測序技術自身會不斷改進,提高測序的準確性、降低錯誤率,并且在通量上可能進一步提升;另一方面,和蛋白組測序銜接的相關流程和分析方法也會不斷優化,從而更精細地從轉錄組信息轉化為可靠的蛋白組信息,推動蛋白組測序領域的發展。 江西嘉安健達二代測序原理單細胞測序屬于二代測序嗎?

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常見的二代測序類型①

全基因組測序(WGS):對生物體整個基因組進行測序,涵蓋所有基因、非編碼區域、調控區域等。能***檢測基因組變異,但數據量和成本較高,適用于復雜疾病研究、物種進化分析等.

全外顯子組測序(WES):針對基因組中全部外顯子區域測序,可快速鑒定基因突變,性價比高,常用于遺傳病診斷、**基因突變檢測等,助力發現致病基因和潛在***靶點.

轉錄組測序(RNA-Seq):對特定細胞或組織在特定狀態下的 RNA 轉錄情況測序,包括 mRNA、lncRNA、miRNA 等,可檢測基因表達水平、剪接變異、可變剪接等信息,用于基因表達調控研究、疾病標志物篩選、藥物研發等.

轉錄組測序的主要測序對象包括以下幾類(下):

長鏈非編碼RNA(lncRNA):lncRNA長度較長,具有多種生物學功能,如參與基因表達調控、染色質修飾、轉錄因子活性調節等。轉錄組測序有助于發現和鑒定新的lncRNA,并分析其在不同組織和細胞中的表達模式及功能機制。其他RNA

環狀RNA(circRNA):circRNA是一類特殊的非編碼RNA,呈環狀結構,具有穩定性高、不易被降解等特點。轉錄組測序可以檢測circRNA的存在和表達水平,研究其在基因表達調控、細胞信號轉導以及疾病發***展中的作用。

小核RNA(snRNA)和小核仁RNA(snoRNA):snRNA主要參與真核生物mRNA的加工過程,如mRNA的剪接等;snoRNA則主要參與rRNA的加工和修飾。轉錄組測序可以對它們的表達和功能進行研究,以揭示其在細胞內的作用機制。 二代測序廣泛應用于醫學研發。

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二代測序用于蛋白組測序的優勢

高通量:二代測序本身具有一次性處理大量核酸序列的能力,在結合蛋白組測序相關應用時,能快速獲取大規模的轉錄組數據,進而可以對眾多潛在的蛋白質信息進行分析推斷,相比傳統逐個蛋白分析的方法,**提高了效率,能夠在短時間內覆蓋更***的蛋白組范圍。

能發現新蛋白及異構體:借助對轉錄組的深度測序,可以挖掘出一些新的轉錄本,這些轉錄本有可能翻譯出全新的蛋白質或者產生蛋白質異構體,有助于拓展對蛋白組復雜程度的認知,發現那些以往可能被遺漏的蛋白質種類和形式。 二代測序的使用場景都有哪些?江西哪里有二代測序運用

二代測序實驗與測序原理是什么?遼寧嘉安健達二代測序應用

不同二代測序技術平臺的速度Illumina測序平臺:這是目前市場上應用較為***的二代測序平臺之一,其測序速度較快。例如IlluminaNovaSeq系列,一次運行可以在1-3天內產生大量的數據,通量可達數億甚至數十億條讀長,能夠滿足大規模基因組學研究和臨床檢測的需求。Roche454測序平臺:Roche454測序系統的測序速度也較快,其特點是測序片段比較長,高質量的讀長能達到400bp左右,一次運行可以在24小時左右完成對一定數量樣本的測序。BGISEQ系列:華大智造的BGISEQ系列測序儀在速度上也有出色表現,如全球二代測序速度**快設備E25量產,為快速測序提供了有力支持遼寧嘉安健達二代測序應用

標簽: 二代測序